[发明专利]植物微小核糖核酸的提取、制备及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物领域。具体地，本发明涉及提取植物microRNA的方法及其应用。

背景技术

微小核糖核酸(microRNA、miRNA或miR)是一类长约19至23个核苷酸的非编码单链小核糖核酸分子。它们广泛存在于动植物细胞中，在进化上高度保守。MicroRNA通过识别靶信使RNA(mRNA)的3’端非翻译序列，与之不完全互补，从而抑制相应蛋白质的翻译。作为mRNA强有力的调节因子，microRNA与生理活动密切相关，涉及生物个体发育、组织分化、细胞调亡及能量代谢等生命活动；同时，microRNA也与许多疾病的发生和发展存在紧密联系。

目前，对植物microRNA研究都集中在microRNA对植物本身的调控作用，包括对植物生长发育、信号转导和逆境胁迫活动的作用。对研究成果的应用则集中于对植物物种的改良，如调节农作物在其食用部分对营养元素的表达。

专利PCT/CN2010/000677公开了源自水稻的MIR164对植株根系的调控作用，提出构建包括MIR164序列的核酸片段，并将其转入水稻植株，从而获得根系比普通水稻强大的转基因水稻。专利PCT/IB2010/055600公开了上调包括MIR156的若干microRNAs可提高植物对环境胁迫因素的耐受能力，进而提高植物的生物质、活力和产量。

目前，现有的研究仅限于植物microRNA对植物本身生理活动的调控作用，但植物microRNA对动物的生理活动的调控作用以及对植物microRNA的提取还有待研究。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种具有调控非植物靶基因的功能的植物microRNA或含有所述microRNA的植物提提取物及其制法和用途。

本发明的另一目的是提供一种鉴定植物功能性microRNA的方法。

在本发明第一方面中，提供了一种分离的植物功能性microRNA或含所述植物功能性microRNA的提取物，所述的植物功能性microRNA是来源于某一植物的内源性microRNA且存在于所述植物的水溶性和/或脂溶性的提取物中，而且所述植物功能性microRNA具有调控非植物靶基因的功能。

在另一优选例中，所述的调控包括抑制(下调)靶基因的表达、促进(上调)靶基因的表达。

在另一优选例中，所述的非植物靶基因包括细菌基因、病毒基因、衣原体基因、酵母基因、动物基因。

在另一优选例中，所述的植物包括：药用植物、果蔬植物、观赏植物；更佳地包括：金银花、菘蓝、草大青、马蓝、胡杨、豇豆、棉花、大白菜或马铃薯。

优选地，所述植物为金银花、菘蓝、草大青、马蓝或胡杨；更优选地，所述植物为金银花。

在另一优选例中，所述的植物功能性microRNA是所述植物的水溶性和/或脂溶性的提取物中富含的microRNA种类(如丰度列前20位，更佳地前10位的microRNA种类)。