[发明专利]一种AFB1降解菌及降解酶

权利要求书

1.一种AFB₁降解菌，其特征在于：该降解菌为米曲霉（Aspergillus oryzane）AOYIN2012Y8 CGMCC No.5817。

2.一种AFB₁降解酶，其特征在于按下法制备获得：

（1）、AFB₁降解菌的固体发酵培养：

将米曲霉（Aspergillus oryzane）AOYIN2012Y8 CGMCC No.5817接种于PDA固体培养基中，28~30℃恒温培养，待孢子大量生长时收获，用接种环将孢子刮下，用含有0.5~0.7 % Tween 80的生理盐水将孢子浓度调整至1.0×10⁸ CFU/mL，按每30g固体发酵培养基接种5~7 mL孢子生理盐水溶液进行接种，混合均匀后于28~30℃恒温培养5~7 d后收获，得固体发酵培养物；

（2）、AFB₁降解酶粗酶液的制备：

将步骤（1）获得的固体发酵培养物与生理盐水混合均匀，室温浸泡，浸泡完成后先过滤，之后将滤液离心，取上清液经盐析、透析纯化得AFB₁降解酶粗酶液；

（3）、凝胶层析分离AFB₁降解酶粗酶液，收集、浓缩、冻干即得AFB₁降解酶。

3.如权利要求2所述的AFB₁降解酶，其特征在于所述固体发酵培养基按如下方法制备：按质量比（6~7）:（2~3）:（1~2）称取麸皮、玉米、豆粕，麸皮、玉米与豆粕的总和为10，而后以固体:水=1:（0.8~1.1）质量比加水，搅拌均匀后，高压蒸汽灭菌。

4.如权利要求2所述的AFB₁降解酶，其特征在于：透析时，采用截留分子量为14 KDa的透析袋；凝胶层析时，所用凝胶为Sephadex G-100，分离范围为4~150 KDa。

5.如权利要求4所述的AFB₁降解酶，其特征在于：透析时，以10 mM、pH 7.4 的Tris-HCl为缓冲液；凝胶层析时，上样速度为3~4mL/5min，洗脱速度为3~4mL/10min，以0.025 M KCl-0.1 M Hac为洗脱液。