[发明专利]与黄瓜有毛基因紧密连锁的基因片段及用途

说明书

技术领域

本发明属于生物基因工程技术领域，涉及黄瓜常规杂交育种、分子标记辅助育种的方法与技术，特别涉及与黄瓜有毛基因紧密连锁的基因片段。

背景技术

1999年秋天在45株黄瓜育种材料中发现了3株具“无毛”性状的突变体，遗传研究表明，无毛性状是由一对核基因控制的隐性性状，与曹辰兴（1999年）的研究结果相一致。黄瓜无毛突变体与普通黄瓜相比，幼苗的各种性状均没有明显变化，整株任何地方均无短刚毛，手感光滑，无扎手感觉，此特点在幼苗子叶展平时就可以与普通黄瓜苗区分。

黄瓜无毛突变体最早由Robinson和Mishanec（1964）报道（通过辐射诱变产生），表现为茎、叶、卷须、花萼、子房均没有表皮毛，果实表面也没有果刺和果瘤，并将该隐性突变基因命名为glabrous（gl）。Whelan（1973）、曹辰兴和郭红芸（1999）也先后发现黄瓜无毛突变体。Inggamer&Ponti（1980）报道的叶片无毛突变体（gl-2）黄瓜NCG-042表现为果柄、花柄、花萼上有稀疏的绒毛，果实上有稀少的果瘤，但是茎、叶及叶柄光滑无毛。研究表明，无毛基因对果瘤基因存在隐性上位作用，参与黄瓜果瘤的形成（曹辰兴等，2001）。

关媛（2008）利用棉花和拟南芥TTG1基因对黄瓜进行同源克隆，得到一个黄瓜TTG1-like基因——CsTTG1，功能验证表明CsTTG1可以互补拟南芥ttg1突变体的表型，但是表达分析证明引起gl突变的基因不是黄瓜TTG1-like基因。张弛等（2009）以曹辰兴和郭红芸发现的无毛突变体和普通有毛黄瓜为亲本，获得了两个与gl基因连锁的SRAP标记ME6EM5和ME23OD15，遗传距离分别为3.6cM和12.9cM。苗晗等（2011）以黄瓜有毛野生类型‘9110Gt’（P1）和无毛突变体‘NCG-042’（P2）（含有叶片无毛基因gl-2）为试材，明确了黄瓜的有毛、无毛性状（gl-2）由一对核基因控制，有毛对无毛为显性。并以F₂为作图群体，构建了包含18个SSR标记的gl-2基因的SSR连锁群，并将该基因定位在黄瓜第2条染色体上，两侧最近的连锁标记为SSR10522和SSR13275，遗传距离分别为0.6cM和3.8cM。

由于无毛性状是由一对核基因控制的隐性性状，非常适合作为形态标记、纯度鉴定的标记性状。因此，对黄瓜无毛性状的研究，特别是确定与黄瓜有毛基因紧密连锁的SSR片段对黄瓜生产和育种都具有重要的理论和实践意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种与黄瓜有毛基因紧密连锁的基因片段。

本发明的第二个目的是提供一种与黄瓜有毛基因紧密连锁的基因片段的用途。

本发明的技术方案概述如下：

一种与黄瓜有毛基因紧密连锁的基因片段，所述基因片段是SEQ ID No.1所述的序列。

上述基因片段在对黄瓜种质资源进行有毛性状筛选或对黄瓜有毛性状进行分子标记辅助育种的用途。

利用本发明的与黄瓜有毛基因紧密连锁的基因片段对构建的F₂代分离群体和黄瓜种质资源进行有毛性状评价，其结果与表型鉴定符合率达100%（数据见表1），在黄瓜育种中进行资源有毛性状筛选和利用具有很大的应用价值。以这些序列为依据，可以进行有毛性状分子标记辅助选择、育种；可以为进行黄瓜有毛基因定位、作图与克隆，通过基因工程改良黄瓜品种的性状奠定基础。

附图说明

图1是本发明的与黄瓜有毛基因紧密连锁的基因片段的获得图谱：其中A(M)为指示DNA标准条带的Marker；B(P₁)为母本F80有毛基因片段；1-5为有毛单株；6-10为无毛单株，M为DNA标准。

图2是F80×F80WM杂交后代F₂代分离情况图谱：其中A(M)为DNA标准；C为F₂群体中有毛基因片段，1～32、42～53、78～93为有毛单株，33～41、54～77为无毛单株。

具体实施方式

本发明是在对黄瓜有毛亲本F80和无毛亲本F80WM及其杂交后代F₁、F₂、BC₁群体进行人工观察鉴定，获得黄瓜无毛种质的基础上，采用SSR技术分离与黄瓜有毛基因连锁的基因片段，进行测序、分析，为种质资源的筛选、分子标记辅助育种奠定基础。