[发明专利]胃癌淋巴结转移的判断方法

说明书

本申请是申请号为200810000445.4、申请日为2008年1月10日、名称为“胃癌淋巴结转移的判断方法”的由同一申请人提交的中国发明专利申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及判断胃癌淋巴结转移的方法、判断装置及其使用试剂盒。

背景技术

近年来，在临床诊断领域，基因检查迅速普及。作为基因检查的一例，有癌症的淋巴结转移诊断。癌细胞脱离原发灶经血管和淋巴管转移到全身。在癌症手术中，需要尽可能将病灶切除干净，因此，要求正确地查出转移，并根据转移的程度采取适当处置。为此，术中的癌细胞淋巴转移的诊断显得尤为重要。作为癌症淋巴结转移的一种诊断方法，即以在正常细胞中不表达或表达量很低、在癌细胞中大量表达的蛋白质的核酸为靶核酸进行检测。随着近年来基因分析技术的发展，通过扩增、检测从生物体切除的淋巴结组织中所含靶核酸即可有效地进行癌症诊断。

为了用这种基因检查的方法检查癌向特定组织的转移，现在越来越多的人热衷于进行使用LAMP法（loop-mediated isothermal amplification method）和聚合酶链反应(PCR法，polymerase chain reaction）等检查癌基因的研究。这种基因检查可以通过检测组织和细胞等所含癌标志物（比如在癌细胞特异表达的蛋白质的mRNA等）进行。

众所周知，癌标志物（以下也单称为标志）之一角蛋白19（CK19）作为诊断乳腺癌淋巴结转移的标志非常有用。CK19是一种公认的在正常淋巴结的表达量和在转移到淋巴结的乳腺癌细胞上的表达量具有有意义之差的分子。

胃癌在中国、日本和韩国等亚洲和南美患者较多。据2003年癌症死亡人数统计，胃癌在日本，在男性中仅次于肺癌居第二位，在女性中仅次于大肠癌位居第二位。而且，癌症自觉症状很少，早期发现很困难，进展转移到淋巴结等的情况很多。

过去，人们使用角蛋白20和癌胚抗原作为判断胃癌淋巴结转移的标志。但关于胃癌基因检查的报告很少，判断胃癌淋巴结转移的更先进的方法有待开发。

发明内容

本发明旨在解决前述问题，目的是提供一种胃癌淋巴结转移的判断方法、判断装置及其试剂盒。

本发明提供一种胃癌淋巴结转移的判断方法，包括：

定量步骤，定量用疑有胃癌转移的淋巴结组织制备的检测试样中的角蛋白19mRNA；

判断步骤，根据所得所述mRNA的定量结果判断胃癌的淋巴结转移。

所述判断步骤包括根据mRNA的定量值判断所述淋巴结组织中的转移灶转移度的步骤。

所述转移度为转移灶大小。

所述转移度为转移灶的癌细胞数。

在所述定量步骤用核酸扩增法定量所述角蛋白19的mRNA。

所述核酸扩增法为定量RT－PCR或定量RT－LAMP。

所述判断步骤包括比较所述mRNA定量值和预定的阈值，当定量值低于阈值时，判断胃癌淋巴结转移阴性，当定量值超过阈值时，判断胃癌淋巴结转移阳性。

所述mRNA定量值是所述检测试样中的所述角蛋白19mRNA的绝对量。

本发明还提供一种胃癌淋巴结转移判断装置，包括：

定量系统，定量用疑有胃癌转移的淋巴结组织制备的检测试样中的角蛋白19mRNA；

判断系统，根据所得mRNA的定量值判断胃癌的淋巴结转移。

所述装置，还具备根据所得mRNA定量值，判断所述淋巴结组织中转移灶的转移度的第二判断系统。

本发明进一步提供一种用于判断胃癌淋巴结转移的试剂盒，其包括，用来制备检测试样的淋巴结组织前处理液、含能检出角蛋白19的引物的引物溶液以及含用于实施核酸扩增法的酶的酶溶液。

所述试剂盒的所述前处理液为含有二甲亚砜的缓冲液。

所述试剂盒的所述酶溶液含有RNA依赖型DNA聚合酶和DNA依赖型DNA聚合酶。

本发明可以提供一种胃癌淋巴结转移的判断方法、判断装置及其所用试剂盒。以此可以进行有效的胃癌基因检查。通过本发明还可以判断有胃癌转移的淋巴结组织中的转移灶的转移度。判断转移灶的转移度可以提供决定是否要手术的指标或决定手术方式的指标。

附图说明

[图1]为本发明一实施方式的判断装置的整体结构斜视图；

[图2]为图1所示判断装置的作为定量系统的核酸扩增测定装置整体结构的斜视图；

[图3]为图2的核酸扩增测定装置的平面略图；

[图4]为本发明一实施方式的判断装置中作为判断系统的个人电脑CPU的转移判断流程；