[发明专利]猪传染性胸膜肺炎、猪链球菌二联灭活疫苗及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种猪传染性胸膜肺炎、猪链球菌二联灭活疫苗及其制备方法，属于兽药疫苗领域。

背景技术

猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌（Actionobacillus pleuropneumoniae，APP）引起的一种呼吸系统重要传染病。本病主要引起猪的一种伴有胸膜炎的纤维素性、出血性、坏死性肺炎，多呈最急性或急性病程而迅速死亡，发病率和死亡率均在50%以上，它可发生于任何年龄的猪只，尤其是在集约化养猪场，一旦发生会造成重大经济损失。

猪胸膜肺炎放线杆菌又称为副溶血嗜血杆菌（H.parahaemolyties），该病原菌生长要求严格，为革兰氏阴性球杆菌，有荚膜。该病原菌血清型众多，根据NAD依赖性，可以分为生物I型和生物II型，其中依赖NAD的猪胸膜肺炎放线杆菌划为生物I型（Biovar I），不依赖NAD的猪胸膜肺炎放线杆菌划为生物II型(Biovar II)，采用传统血清型方法，又可细分为15个血清型；其中生物I型包括血清1-12型和15型，生物II型包括血清13型和14型。猪胸膜肺炎病的病原血清型众多，给猪胸膜肺炎病的预防与控制带来了困难。

猪链球菌（Streptococcus suis）是条件致病菌，广泛分布于自然界中，在动物的呼吸道、肠道、生殖道等处常在，可引起猪脑膜炎、关节炎、心内膜炎、败血症、肺炎和突然死亡，严重危害养猪业的发展。猪链球菌为革兰氏阳性菌，可在外界环境中存活很长时间，特别是在粪便中及被污染的环境和带菌猪是重要的传染源，超急性死亡的猪只不出现任何症状。猪只不分品种、年龄和性别，一年四季都可以感染本病，哺乳和断奶后仔猪发病死亡率高达80%以上，并有一定人畜共感染性。猪链球菌至少分为5种类型：急性败血性、脑膜炎性、关节炎性、脓肿性和无乳型。

由于猪胸膜肺炎病血清型和猪链球菌的类型众多，对两种疾病共感染、同时发病的养殖场，没有有效的应对措施，常常带来巨大损失。

发明内容

有鉴于此，本发明的主要目的在于提供一种新型猪传染性胸膜肺炎、猪链球菌病二联多价灭活疫苗，包含至少一种已灭活的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌抗原和至少一种猪链球菌抗原，以预防和治疗猪胸膜肺炎病和猪链球菌引起的疾病。

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌抗原是指含有至少一种猪传染性胸膜肺炎放线杆菌抗原形式的任何组合物，所述猪传染性胸膜肺炎放线杆菌抗原接种猪可诱导、刺激或增强抵抗猪传染性胸膜肺炎放线杆菌感染的免疫应答。猪传染性胸膜肺炎放线杆菌为包括本领域技术人员熟知的临床分离的野毒株，包含目前已鉴定的1～15个血清型。优选地，所述猪传染性胸膜肺炎放线杆菌抗原是完整的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌，优选为灭活形式，更优选，所述猪传染性胸膜肺炎放线杆菌抗原是灭活的血清型为1型、5型和7型的混合抗原；最优选为灭活的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清1型LC株，和灭活的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清5型YC株，和灭活的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清7型YS株。

本发明的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌抗原还可以包含以下组合物的任一种抗原：如武汉科前动物生物制品有限责任公司的猪传染性胸膜肺炎三价灭活疫苗（APP血清型1型、2型和7型）；中牧实业股份有限公司成都药械厂的猪传染性胸膜肺炎三价灭活疫苗（APP血清1型、2型和7型）。

正如本领域技术人员所知，不同的微生物野外分离株在基因序列上有微小的变异，然而，当变异不影响其蛋白质合成、结构或者主要作用功能区时，该微生物之他种野外分离株即使基因序列无法百分之百相同，其基本的生理功能并不会有所改变。因此，目前国际上常使用16S Ribosomal RNA（16S rRNA）来进行细菌型的分辨，因此在相似性的比较上可以用16S rRNA来进行比对而得到其同源性。所以，在16S rRNA具有同源性的前提下，本发明所使用的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌抗原并不限定于本发明所使用的野外分离株。

16s rRNA基因是细菌染色体上编码rRNA相对应的DNA序列，存在于所有细菌的染色体基因组中。16S rRNA具有高度的保守性和特异性以及该基因序列足够长（包含约50个功能域）。