[发明专利]一种药用肉穗草丛芽快速成苗方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种药用肉穗草丛芽快速成苗方法。

背景技术

肉穗草（Sarcopyramis bodinieri Levl. Et Van）为野牡丹科植物，生于海拔1000-2450m的山谷密林下、阴湿的地方或石缝间。《中华本草》记载：肉穗草清热利湿；消肿解毒。主热毒血痢；暑湿泄泻；肺热咳嗽；目赤肿痛；吐血；疔疮肿毒；外伤红肿；毒蛇咬伤。民间用于治疗急性肝炎（甲肝、乙肝急性期）疗效最佳，对慢性肝炎及乙肝病毒携带者亦有效。在福建闽南一带销量较大，目前野生资源日趋枯竭。肉穗草自然繁殖系数低,人工栽培采用分株或扦插繁殖成活率不高。采用植物组织培养技术, 以野生肉穗草末端茎段为外植体，在无菌条件下将含有一个茎节的茎段接种于培养基上生长，再经多次转接培养，可以培育成大量的肉穗草种苗。本发明是肉穗草种苗快速繁殖的重要方法之一。

发明内容

本发明所述的一种药用肉穗草丛芽快速成苗方法，为人工栽培肉穗草提供种苗，发展肉穗草生产，即能保护我国药用野生资源肉穗草，又能满足市场的需求。本发明采用植物组织培养技术, 以野生肉穗草末端茎段为外植体，在无菌条件下将含有一个茎节的茎段接种于培养基上生长，再经多次转接培养，可以培育成大量的肉穗草种苗。本发明是肉穗草种苗快速繁殖的重要方法之一。

为实现上述目的，本发明采用的具体的技术方案为：

一种药用肉穗草丛芽快速成苗方法，其特征在于：所述的快速成苗方法包括以下步骤：（1）取材消毒；（2）培养基培养；（3）种苗移植栽种；所述培养基包括不同生育阶段的三种培养基,这三种培养基配方分别为： 

①　丛芽诱导培养基：MS + 0.5mg/L BA + 0.2mg/L NAA，白糖30 g/L，琼脂0.7%，pH5.6；

②　丛芽增殖培养基：MS + 2.0mg/L BA + 0.2mg/L NAA，白糖20 g/L，琼脂0.6%，pH5.6；

③　壮苗生根培养基：1/2MS + 0.1mg/L NAA + 0.1mg/L IBA, 活性碳0.2%，白糖15 g/L，琼脂0.5%，pH5.6。

所述的取材消毒具体步骤为：从野生肉穗草植株切下带顶芽的嫩茎段或带节的嫩茎段，用自来水冲洗干净；在无菌条件下操作，将切下的嫩茎段先用75%的酒精消毒10s，再用0.1%的升汞溶液浸泡8～12min，最后用无菌水冲洗5～6次；沥干水分，放入无菌的培养皿中备用；

所述的培养基培养具体步骤为：将消毒后备用的嫩茎段在无菌条件下切成长0.5-1.5cm、含一个茎节的茎段，接种于丛芽诱导培养基上，接种完毕，置培养室内进行培养；当茎段产生丛芽后，将有产生丛芽的茎段转入丛芽增殖培养基进行培养，扩大丛芽数量。当丛芽高度达到1.5～2.5cm时，将丛芽分成1～2个，转到壮苗生根培养基进行培养，即生长成带有根的肉穗草种苗。

所述培养基培养的具体条件为：

1)      丛芽诱导培养基：  采用丛芽诱导培养基，接种后置光照培养箱内培养，设定温度25℃，湿度60%～65%，光照1000～1200 lx，12h/d；

2)      丛芽增殖培养基：采用丛芽增殖培养基，接种后置光照培养箱内或培养架上培养，设定温度25～26℃，湿度65%～70%，光照强度1200～1500lx，光照12h/d；

3)      壮苗生根培养基：采用壮苗生根培养基，接种后置光照培养箱内或培养架上培养，设定温度25～27℃，湿度65%～70%，光照强度1500～2000lx，光照12h/d。

所述种苗移植栽种的步骤具体为：

i.      炼苗：打开瓶盖，炼苗3～5天，保持空间湿度80%～85%，温度25℃；假植：将步骤i炼苗后的种苗取出，洗净附着在根部的培养基，用0.1%的多菌灵消毒液浸泡5min，种植到装有基质的苗盆中，放置在阴凉处培养，保持苗盆基质湿润，其中所述的基质以重量计为：１份菜园土＋１份粗砂＋２份木屑，混合均匀，经过消毒处理；种苗假植后五天浇一次营养液，所述营养液为含0.1%(wt)尿素+0.1%(wt)磷酸二氢钾+0.1%(wt)过磷酸钙的水溶液，假植1个月后移大田栽培；

ii.  大田栽培：大田畦宽80～100 cm、畦高10～15 cm ,施5～6 kg/100m² 的钙镁磷肥作基肥；移植株行距5 cm ×5 cm。

具体实施方式

 下面举例说明本发明，但本发明的保护范围不限于此。