[发明专利]玉米耐旱种质鉴定和筛选CAPS标记及其检测方法和应用有效
| 申请号: | 201210235665.1 | 申请日: | 2012-07-06 |
| 公开(公告)号: | CN102766623A | 公开(公告)日: | 2012-11-07 |
| 发明(设计)人: | 郝转芳;翁建峰;李明顺;梁晓玲;柳思思;阿布来提;邵红雨;韩登旭;杨杰;李新海;张世煌 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院作物科学研究所;新疆农业科学院粮食作物研究所 |
| 主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12N15/63;C12Q1/68 |
| 代理公司: | 北京维澳专利代理有限公司 11252 | 代理人: | 马佑平 |
| 地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 玉米 耐旱 种质 鉴定 筛选 caps 标记 及其 检测 方法 应用 | ||
1.玉米耐旱种质鉴定的分子标记,其特征在于,所述分子标记包括dhnC397和rspC1090,其中所述分子标记dhnC397的核苷酸序列如SEQ.ID No1所示,所述分子标记rspC1090的核苷酸序列如SEQ.ID No2所示。
2.扩增权利要求1所述分子标记的引物。
3.如权利要求2所述引物,其特征在于,所述dhnC397的引物序列如SEQ.ID No3和SEQ.ID No4所示,所述rspC1090的引物序列如SEQ.ID No5和SEQ.ID No6所示。
4.含有权利要求1所述分子标记的载体。
5.一种利用分子标记进行玉米耐旱种质鉴定和筛选的检测方法,其特征在于,该方法所用的分子标记为dhnC397和rspC1090。
6.如权利要求5所述的方法,具体步骤为:利用权利要求3所述分子标记的引物扩增目标植物基因组DNA,得到该分子标记在目标植物中的特征谱带,所述携带目标等位基因型的植株谱带所测得的核苷酸序列为权利要求1所述的分子标记的核苷酸序列。
7.如权利要求6所述的方法,其特征在于,所述分子标记的PCR扩增体系如下:20μL反应体系包括正、反向引物各0.5μM,0.2mM dNTPs,2.5mM MgCl2,1X Taq buffer,0.5units Taq聚合酶,DNA模板100ng。
8.如权利要求6所述的方法,其特征在于,所述PCR扩增的程序为:94℃预变性5min;94℃变性30s,55℃-60℃退火45s,72℃延伸30-60s,37个循环;72℃延伸5-10min。
9.如权利要求6所述的方法,其特征在于,获得特征谱带的方法为用8%的聚丙烯酰胺凝胶电泳。
10.权利要求1所述分子标记、或权利要求5-9任意一项所述方法,在玉米耐旱种质鉴定和筛选及分子标记辅助育种中的应用。
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