[发明专利]一种输血前配合试验的试剂组及其试验方法

说明书

技术领域

本发明为一种输血前配合试验的试剂组及其试验方法，特别是一种能改善传统手工凝聚胺法检测灵敏度的试剂组及其试验方法。 

背景技术

血型是对血液分类的方法，是一种遗传的特征，临床上所说的血型是指红血球表面抗原构造的差异。从广义来说，血型包括红血球、白血球、血小板、血浆等血液成分不同的抗原系统。人类最早认识的血型系统是ABO血型系统，例如：红血球上含有A抗原便称为A型；这是由奥地利维也纳大学病理研究所的卡尔·兰德施泰纳(Karl Landsteiner)于1900年发现，健康人的血浆对不同人类个体的红血球有凝聚作用，因而建立了ABO血型系统。之后，新的血型系统不断被研究发现，并由1935年成立的国际输血学会专门负责认定与命名工作。目前获得承认的30种人类血型系统超过600种抗原，但其中大部分都非常罕见。 

血型系统对输血具有重要意义，以不相容的血型输血可能导致溶血反应的发生，造成溶血性贫血、肾衰竭、休克以至死亡。对于人类来说，虽然『ABO血型系统』和『Rh血型系统』在国际输血协会承认的30种血型系统中是最重要的两种，但是在临床上并不是仅仅只有这两种血型系统的不同血型间，才会有输血不相容的反应发生，故病患必须在输血之前，先在血库作一系列检查来选择正确安全的血液，才能确保输血的安全性。 

另外，一般在输血前的有限时间内会执行所谓的交叉配血试验，利用受血者血浆与供血者红血球做配对，以检测受血者的血浆中是否含有会与供血者的红血球表面抗原发生表面抗原反应的未知抗体，或利用受血者红血球与供血者血浆做配对，以检测受血者的红血球上是否存在会与供血者血浆中所含有的抗体发生凝集反应的未知表面抗原。因此，综观上述所言，所谓的『输血前配合试验』，包括有『ABO及Rh血型的鉴定』、『抗体的筛检或鉴定』及『交叉配 血试验』等三种。 

在习知上，亚洲国家一般都采用所谓的『手工凝聚胺法(Manual Polybrene，简称MP法)』来执行输血前配合试验，其主要采用的凝聚胺(Polybrene)试剂，是一种多价阳离子氨基聚合物，它可以引起正常红血球的可逆性凝集。在习知的手工凝聚胺法检验流程中，首先让供血者红血球和受血者血浆在低离子介质(low ionic medium，简称LIM)中使抗体与红血球抗原结合，然后加入凝聚胺使红血球发生可逆性凝聚，之后经过离心沉淀后，再加入柠檬酸盐再悬浮溶液(柠檬酸根带负电荷)中和凝聚胺正电荷，就可恢复红血球表面的负电荷。此时，若红血球是因凝聚胺试剂所造成的非特异性凝聚，当加入柠檬酸盐再悬浮溶液后，红血球表面会恢复负电荷，红血球间随即因互斥力而散开，结果为阴性反应；若红血球是由于抗原抗体引起的特异性凝集，则不会受柠檬酸盐再悬浮溶液的影响而散开，结果为阳性反应。 

然而，传统手工凝聚胺法的检测方法与试剂配方对抗体侦测灵敏度太高，通常对于不具有临床意义的抗体的检测结果（如：冷型抗体、非特异性抗体…）也为呈现阳性反应，这会加重后续抗体鉴定的工作量，不仅耗费时间，也可能造成病患面临无适合血袋可用的窘境，故这对于当病患急需用血时，将产生很大的危险性。因此，发展一种仅对有临床意义的抗体具有很高的侦测灵敏度，但却对不具临床意义的抗体有较低的侦测灵敏度的试剂配方或检验方法，实有其必要性。 

另外，影响传统手工凝聚胺法准确度的关键在于血浆(或血清)与血球的比例要大于50倍，低于50倍则侦测灵敏度不佳；一般来说，传统手工凝聚胺试管法的比值约为66.67倍(即100μL：1.5μL)。然，上述已提过除了『ABO血型系统』和『Rh血型系统』两大血型必须确认外，尚还有其他的血型系统也会有产生输血不相容的反应，因此，若要在进一步的作更详尽的抗体筛检或鉴定，就必需要抽取病患更多的血液检体，这对于一个缺血的病患而言，无疑是雪上加霜。因此，假使检测时只需微量样本液体，将其血浆(或血清)与血球的比例提升到远大于50倍，甚或100倍以上，即可获得高准确性的检测结果，对于病患而言无非是一大福音。 

未来若能再结合自动化、平行大量检测的设备与方法，将可节省检测时间 与人力，降低检测成本，同时又能达到检验作业流程标准化的目标。 

发明内容

本发明提供一种用于输血前配合试验的试剂组，可以改善传统手工凝聚胺法检测灵敏度，该试剂组包含血球清洗液、低离子介质溶液、凝聚胺溶液及再悬浮溶液。