[发明专利]一种固相合成替莫瑞林的方法

说明书

技术领域

本发明涉及替莫瑞林的制备方法，尤其涉及固相多肽合成替莫瑞林的制备方法。

背景技术

中文名：替莫瑞林或醋酸替莫瑞林。商品名：Egrifta 。英文名：tesamorelin。结构式：trans-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-Glu-Ser-Asn-Gln-Glu-Arg-Gly-Ala-Arg-Ala-Arg-Leu-NH₂；分子式：C221H366N72067S1，分子量：5135.9。

艾滋病是严重威胁世界人民健康的公共卫生问题，1983年，人类首次发现HIV。目前，艾滋病已经从一种致死性疾病变为一种可控的慢性病。我国艾滋病患者也逐年增加。艾滋病药物的副作用已经不是什么秘密，药物所产生的副作用就是脂肪代谢障碍。脂肪代谢障碍表现为脂肪重新分布，一种形式为脂肪流失，就是通常所讲的肌肉萎缩。特别容易发生肌肉萎缩的部位有脸、胳膊、腿和屁股。另一种形式为脂肪堆积，容易发生脂肪堆积的部位有后颈部、胸部和肚子。通常脂肪代谢障碍可导致背部和颈部疼痛，同时也可引起头痛和呼吸困难。 Egrifta是FDA批准的首个脂肪代谢障碍治疗药物，属于人生长激素释放因子（GRF）类药物。Egrifta是通过诱导内源性生长激素(GH)的释放来发挥作用。采用Egrifta治疗可刺激GH分泌和增加血清胰岛素样生长因子I(IGF-I)的水平。

中国药物化学杂志第21卷，第三期，2011年6月总101期上报道，替莫瑞林的合成采用Fmoc固相合成法:以Fmoc-Pal-PEG树脂做为固相合成树脂，用Bop/HoBt作为缩合剂，将N 端被Fmoc 保护的氨基酸和( E) -3-己烯酸反应连接到树脂的支臂上，形成多肽链，这种合成方法反应时间长，Fmoc-Pal-PEG树脂来源稀缺，价格贵，该方法限制了替莫瑞林的大规模生产和使用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种高收率，低成本，反应原料简单易得，有利用实现产业化的替莫瑞林的固相合成工艺，主要解决现有合成方法存在的反应时间长、原料贵的技术问题。

本发明的技术方案：一种固相合成替莫瑞林的方法，包括如下步骤：

以Rink Amide AM树脂或Rink Amide  MBHA树脂为起始原料，按照固相合成的方法依次连接具有Fmoc保护基团的氨基酸和反式己烯酸，合成得到侧链全保护的替莫瑞林的树脂，其间依次脱去Fmoc保护基团，用Bop/HoBt、HBTU∕HoBt、TBTU/HoBt、DIC/HoBt、HATU/HoBt、PyBop/HoBt、HCTU/HoBt、PyAop/HoBt、TATU/HoBt、Bop/HoAt、HBTU∕HoAt、TBTU/HoAt、DIC/HoAt/、HATU/HoAt、PyBop/HoAt、HCTU/HoAt、PyAop/HoAt或TATU/HoAt中的任何一种为缩合剂，进行偶联反应，得保护的替莫瑞林的树脂后，同步进行脱侧链保护基团及切肽，获得替莫瑞林粗肽，用C18或C4柱进行分离纯化，经冷冻干燥得到产品。

本发明中一些常用的缩写具有以下含义：

Rink Amide AM：林克氨甲基

Rink Amide  MBHA：林克4-甲苯氢胺

Fmoc：芴甲氧羰基

Bop：卡特缩合剂

HOBt：1－羟基苯骈三唑

HBTU：苯并三唑-1-四甲基六氟磷酸酯

TBTU: 苯并三氮唑-N,N,N’,N’四甲基脲六氟磷酸酯

DIC：N,N'-二异丙基碳二亚胺

HATU：O-(7-偶氮苯并三氮唑-1-氧)-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸酯

PyBop: (苯并三唑-1-氧)三吡咯烷子基磷鎓六氟磷酸盐

HCTU: 6-氯苯并三氮唑-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸酯

PyAop: （3H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶-3氧基）三-1-吡咯烷基鏻六氟磷酸盐

TATU: O-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸盐

HOAt：1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑

DIC：N,N-二异丙基碳化二亚胺