[发明专利]检测自身免疫性肝病相关抗体抗LC-1抗体的试剂盒及其检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物检测领域，尤其是涉及一种检测自身免疫性肝病相关抗体抗LC-1抗体的试剂盒，本发明还涉及使用该试剂盒检测抗LC-1抗体的方法。

背景技术

自身免疫性肝病(autoimmune liver diseases)主要包括三种与自身免疫密切相关的、以肝胆损伤为主的疾病:自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis, AIH)、原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis, PBC)和原发性硬化性胆管炎(primary sclerosing cholangitis,PSC)。AIH是一种伴循环自身抗体和高免疫球蛋白血症、病因未明、呈慢性炎性坏死的肝脏疾病，PBC是以自身免疫介导的肝内胆管损伤、以后呈肝纤维化、最终导致肝功能衰竭为特征的一类病因不明的自身免疫性肝脏疾病，PSC是一种原因不明的慢性综合征，其特征是肝外和/或肝内胆管弥漫性炎症及纤维化所引起的慢性胆汁淤积症。

近年来，国际上对自身免疫性肝病基础与临床的研究高度重视，并且进展迅速，主要涉及自身免疫性肝病的发病机制、遗传背景、相关自身抗体及其靶抗原性质、临床流行病学、临床诊断及治疗和预后等方面。自身免疫性肝病的诊断主要依靠病史、临床表现、体征和实验室检查结果。肝组织病理学检查被认为是AIH, PBC诊断的“金标准”，但此项检查临床应用具有局限性，例如，自身免疫性肝病的肝活检组织病理学表现特异性不强，非自身免疫性肝病所特有；患者不愿或不适接受此项创伤性检查；此外，目前多数医院采用B超引导下细针穿刺取材进行肝组织病理学检查，此检查受取材标本局限，是否能取得病变组织，对检查结果影响很大。尽管如此，肝组织病理学检查对自身免疫性肝病诊断、鉴别诊断及病变程度的判断至关重要，仍是诊断的重要标准之一。AIH，PBC早期病变(胆管炎期、慢性胆汁淤积期)属临床治疗可逆转期或可部分逆转期，后期或终末期(肝纤维化/肝硬化期、肝衰竭期)属临床治疗不可逆转期，愈后不佳。因此，早期诊断、早期治疗尤为重要。自身免疫性肝病发病机制与免疫功能异常密切相关，自身抗体在发病机制中起重要作用。每种自身免疫性肝病都具有特征性自身抗体谱，自身抗体检测对自身免疫性肝病的诊断、分型及鉴别诊断具有重要意义。近年来，国外对自身免疫性肝病相关自身抗体谱靶抗原性质、临床诊断应用价值(尤其是无症状期的早期诊断)、与疾病临床特点及活动性的关系等方面研究进展迅速，有关自身抗体谱的研究已引起临床高度重视，自身抗体检测已成为自身免疫性肝病临床诊断的常规检查项目。

近年来，由于临床经验的积累和实验室诊断技术的进步，发现我国人群中自身免疫性肝病患者逐渐增多。国内有关自身免疫性肝病的发病机制、相关自身抗体靶抗原、病例报道、临床病例讨论和临床病理分析的文章逐渐增多，以上的工作说明自身免疫性肝病在中国并不少见。

抗LC-1抗体被认为是Ⅱ型AIH的-个标记抗体，属器官特异性而非种属特异性自身抗体，抗LC-1抗体为Ⅱ型AIH的特异性抗体，在Ⅱ型AIH患者中的阳性率约为30％，在临床上，抗LC-1抗体多见于年龄小于20岁的年轻AIH患者，年龄大于40岁的AIH患者少见，该抗体的滴度与Ⅱ型AIH的疾病活动性具有相关性，对疾病的早期治疗有很大的帮助，为AIH的疾病活动标志及预后指标。临床上常用间接免疫荧光法 (IIF)检测患者中出现的抗LC-1抗体，其实验基质通常为不同灵长类动物的肝脏、胃、肾脏组织冰冻切片，含有完整的抗原谱，但是对间接免疫荧光分析法着染得鉴定具有一定的主观性，因而对结果的解释可能在不同时间点、不同观察者之间、新老组织切片之间存在差异，并且需要荧光显微镜等仪器的辅助，在一般的中小医院难以开展。所以，目前对抗LC-1抗体的诊断方法还需进一步的改进。

发明内容

本发明的目的在于提供一种检测自身免疫性肝病相关抗体抗LC-1抗体的试剂盒，使用该试剂盒可以定量和定性检测抗LC-1抗体，从而准确诊断出自身免疫性肝病的类型及严重程度，指导医生用药；本发明还公开了使用该试剂盒检测抗LC-1抗体的方法，该方法灵敏度高、特异性强、准确性好，适用于半自动或全自动检测系统或肉眼判读。

为实现上述目的，本发明可采取下述技术方案：