[发明专利]恒河猴NY-ESO-1蛋白、其编码基因及应用

说明书

技术领域

本发明属分子生物学和基因工程领域，涉及源自恒河猴肿瘤抗原NY-ESO-1蛋白、其编码基因及应用，特别涉及包含衍生自恒河猴肿瘤抗原NY-ESO-1中的抗原的多肽和载体。

背景技术

NY-ESO-1是1997年由Chen等人使用重组cDNA文库血清学分析法（Serological analysis of recombinant cDNA expression libraries,SEREX）筛选来自食管癌组织的cDNA表达文库而发现的；NY-ESO-1属于肿瘤-睾丸抗原（Cancer-Testis Antigen，CT）家族，在正常人中其表达仅限于睾丸、卵巢及胚胎滋养层细胞，在其它成年体细胞组织中不表达（Simpson,Nat.Rev.Cancer，5(8):615-625（2005）;Chen,PNAS USA,1997,94(5):1914-1918;Lethe,Int J Cancer,1998,76(6):903-908）。

研究显示，人源（Homo sapiens）NY-ESO-1在多种组织类型肿瘤中呈不同程度的表达，包括但不限于神经母细胞瘤、恶性黑色素瘤、卵巢上皮癌、前列腺癌、肝细胞癌、食管癌和子宫癌等（Nicholaou T,Immunol Cell Biol.2006Jun;84(3):303-17;Jungbluth,Int.J.Cancer，2001,92(6):856-860;Odunsi,Cancer Res,2003,63:6076-6083;Perez,Int.J.Cancer，2008,123:1551-1555）。NY-ESO-1抗原在癌症患者中引起较强的免疫原性，因而被广泛应用于肿瘤疫苗的开发，在肿瘤治疗中配合手术及放疗、化疗等手段，能有效的限制癌组织的转移、复发。

有研究报道，所述NY-ESO-1既能诱导体液免疫应答，又能激活CD4⁺T和CD8⁺T淋巴细胞，血清NY-ESO-1抗体阳性的患者中超过90%会产生NY-ESO-1特异性细胞毒性T细胞（Jager，PNAS USA2000(9):4760-4765）。NY-ESO-1的强免疫原性可能与它存在多个能被人白细胞抗原（HLA）识别的表位有关。目前，已经鉴定出多条HLA-I类和HLA-II类限制的肽（Jager，J.Exp,Med,1998,187(2):265-270;Yamaguchi,Clinical Cancer Res.,2004,10(3):890-961;Davis,PNAS USA,2004,101(29):10697-10702）。在临床试验中，具有对于HLA-A2的结合基序的3种部分重叠的NY-ESO-1衍生肽（p157-165、p157-167和p155-163）已在疫苗中使用，用于治疗表达NY-ESO-1的转移性肿瘤的患者；上述研究证实，合成NY-ESO-1肽可安全地使用，且能产生潜在有利的T细胞应答（Jager,PNAS USA 2000(9):4760-4765）。国内外对NY-ESO-1疫苗在多种肿瘤中的免疫治疗临床实验报道包括：多肽疫苗和全长蛋白疫苗；如，Odunsi K等人将多肽NY-ESO-1p157-170与不完全弗氏佐剂联合使用作为疫苗，发现该疫苗可诱导多数患者产生体液免疫和细胞反应，部分患者在接种后1年仍可检测出特异性T细胞反应，且在所报告的治疗过程中，除接种部位的红肿、疼痛之外，尚未发现与试验疫苗相关的严重不良反应（Odunsi,PNAS USA,2007,104:12837-12842）。

现有技术公开了恒河猴（Macaca mulatta）基因组已于2007年完成测序（G Weinstock,Science 2007,13;316(5822):222-34.），与人（Homo sapiens）基因组同源性约为93%。据美国国立生物技术信息中心（Center of Biotechnology Information,网址http://www.ncbi.nlm.nih.gov/）数据库检索显示，NY-ESO-1仅在灵长类动物中有高度同源性mRNA表达，其中恒河猴NY-ESO-1的mRNA与人源NY-ESO-1同源性为87%，蛋白同源性为89%。本发明拟研究开发恒河猴NY-ESO-1全蛋白潜在的肿瘤疫苗价值，及其含有的未知的HLA-I和HLA-II限制性多肽表位，期望含有恒河猴NY-ESO-1基因的核酸疫苗将具有抗肿瘤免疫治疗的应用前景。

发明内容

本发明的目的是提供一种新的来源于恒河猴（Macaca mulatta）的NY-ESO-1蛋白。