[发明专利]一种加锡果宁的提纯方法

说明书

技术领域

本发明属于天然产物分离领域，尤其是涉及一种采用ODS反相硅胶法精制加锡果宁的方法。

背景技术

加锡果宁，别名加锡碱，加锡弥罗果碱，属于喹啉类生物碱。白色片状结晶(乙酸乙酯)，mp114～117℃，[α]D-23°(c=1.0,氯仿)。分子式：C₁₆H₂₁NO₂；分子量：291.35；结构式：

。

加锡果宁具有多种药理作用，如1.较强的镇痛作用；2.中枢抑制作用；3.抑制荷包牡丹碱在大鼠海马脑片CA1区诱发的痫样放电，对抗荷包牡丹碱的致痫作用。文献“加锡果宁的中枢神经抑制作用”通过实验研究表明加锡果宁在一定剂量范围内对小鼠可明显缩短巴比妥或安定的翻正反射消失潜伏期和延长睡眠时间。

香果肉，拉丁名：Casimiroa edulis Liave er Lex，主要分布于云南。已知香果肉对中枢神经具有抑制作用。加锡果宁是其主要活性成分。

经文献检索，尚未发现采用ODS硅胶柱提取纯化加锡果宁的方法报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种高含量的加锡果宁的制备方法，该方法操作简便，能耗相对小，且制得的加锡果宁较纯。

为了解决上述技术问题，本发明的目的是这样来实现的：

1）将香肉果的树皮粉末加6~12倍量的醇液回流或冷浸提取2~5次，每次提取1~18h，提取液回收溶剂至无醇味，加酸调至pH2~5，过滤得酸液；

2）将上述酸液调碱，加入2~4倍量的氯仿萃取1-5次，静置分层，放出氯仿层，回收氯仿得浓缩液；

3）将上述浓缩液与ODS硅胶拌样，挥干溶剂，上样，用甲醇-水或者乙腈-水混合溶剂洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥即得产品。

所述步骤1）中的醇液是指40~75%的乙醇或甲醇溶液，酸选用盐酸、硫酸或甲酸中的一种。

所述步骤2）中用于调碱的是氢氧化钠或氢氧化钾溶液，调节至pH9.5~11。

所述步骤3）中ODS硅胶用量是药材量的1/2~3/4（W/W），洗脱溶剂为55~70%甲醇水溶液或者乙腈水溶液。

本方法积极效果是：

1）本方法采用ODS硅胶柱纯化，可得到高纯度的加锡果宁，硅胶可重复利用；

2）本方法工艺步骤操作较简单，易操作，所得产品纯度高。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

取香肉果的树皮粉末1kg，加6L的40%的甲醇溶液回流提取5次，每次提取1h，提取液回收溶剂至无醇味，加盐酸调至pH2，过滤得酸液，加氢氧化钠溶液调节至pH9.5，加入2倍量的氯仿进行萃取，静置分层，放出氯仿层，重复萃取5次，合并萃取液回收氯仿得浓缩液。称取药材量的450gODS硅胶装柱，另取50gODS硅胶与浓缩液拌样，挥干溶剂，上柱，用55%甲醇水溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥即得产品31mg，含量97.1%。

实施例2：

取香肉果的树皮粉末1kg，加12L的75%的乙醇溶液冷浸提取2次，每次提取18h，提取液回收溶剂至无醇味，加硫酸调至pH5，过滤得酸液，加氢氧化钾溶液调节至pH11，加入4倍量的氯仿进行萃取，静置分层，放出氯仿层，回收氯仿得浓缩液。称取700gODS硅胶装柱，另取50gODS硅胶与浓缩液拌样，挥干溶剂，上柱，用70%乙腈水溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥即得产品26mg，含量93.5%。

实施例3：

取香肉果的树皮粉末10kg，加80L的60%的乙醇溶液回流提取3次，每次提取2h，提取液回收溶剂至无醇味，加甲酸调至pH4，过滤得酸液，加氢氧化钾溶液调节至pH10，加入3倍量的氯仿进行萃取，静置分层，放出氯仿层，重复萃取3次，合并萃取液回收氯仿得浓缩液。称取药材量的6kgODS硅胶装柱，另取500gODS硅胶与浓缩液拌样，挥干溶剂，上柱，用60%甲醇水溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥即得产品274mg，含量92.3%。