[发明专利]一种小鼠结肠肌电生理活动测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及医疗评价及检测技术领域，具体地说涉及一种鼠结肠肌电生理活动测定方法及用途。 

背景技术

随着人们生活水平的提高、工作节奏的加快，便秘的发病率逐年上升。便秘作为一种常见的临床症状，目前确切病因不明。据研究显示，便秘患者结肠推进性收缩波数目减少，收缩幅度减低，导致粪便在结肠通过减慢。由于结肠在有效地促使粪便排出体外方面具有重要作用，因此便秘常被认为是结肠动力异常所致。 

结肠的肌电动作电位产生于慢波之上，与平滑肌收缩相一致，是推进性运动的主要动力，因而结肠肌电活动作为一项客观的电生理指标，可间接反映结肠动力状况。记录肌电活动是目前结肠动力研究的重要方法之一。目前在大鼠身上的电极埋植技术已有公开文献报道，但该技术在小鼠动物身上均难以实现。 

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种鼠结肠肌电生理活动的测定方法及用途。 

本发明公开了一种测定鼠结肠肌电生理活动的方法，包括如下步骤： 

a) 取鼠，麻醉，使其仰卧于手术台上；

b) 消毒，沿下腹正中纵行切开腹部，显露回盲部，于距盲肠1-1.5cm的结肠处安置一对铜丝电极；

c) 导线经切口引出接肌电信号记录仪。

其中所述的鼠为小鼠。 

其中步骤b)中，铜丝的直径为0.25-0.5cm。 

其中步骤b)中，两铜丝电极相距0.5cm。 

其中步骤b)中，将铜丝电极插入浆肌层内。 

其中步骤c)中，肌电信号记录仪的灵敏度参数选择：时间常数为0.001s，增益放大倍数为250-500，高频滤波为15-30HZ。 

其中步骤c)中，肌电信号记录仪为BL-410、BL-420、BL-420F等BL-410系列生物机能实验系统。 

本发明的另一目的是提供基于便秘小鼠动物模型的药物筛选平台，即结肠肌电活动测定方法在便秘小鼠模型中的应用。 

便秘为临床常见症状，发病率高，常以排便间隔延长、大便干结、大便艰涩不畅为主要表现。因其病因不明确，临床疗效欠佳，本发明通过建立小鼠便秘模型，观察其结肠肌电生理变化情况，分析便秘小鼠结肠肌电生理电活变化与便秘的内在联系，从而探讨可能发生便秘的机制，为其临床防治便秘提供理论依据。 

本发明首次成功将结肠肌电生理活动测定方法应用于便秘小鼠，该测定方法材料易得，简单易行，重复性好，成功率高，对研究对象损失轻微，适用于小鼠等小动，可客观地反映小鼠不同生理状态下结肠肌电活动的变化，为系统研究结肠运动机理及为便秘的防治提供了有力的工具。 

附图说明

图1 对照组小鼠结肠肌电图。 

图2 便秘组小鼠结肠肌电图。 

具体实施方式

材料与方法 

1材料 

实验动物：健康昆明小鼠，体重在20g~28g之间，雌雄各半。

试剂：复方地芬诺酯片为江苏平光制药有限责任公司产品（批号：0805221，2.5g/片），曙红Y为上海永叶生物科技有限公司（CAS号：17372-87-1）。

导线：铜丝，直径为0.25mm。

仪器：BL-410生物机能实验系统。

2 方法 

2.1 药物给予方法

灌胃给药。

2.2 结肠肌电活动参数分析 

将每组的记录结果以3min作为一个时间段的频率和振幅的均值、标准差及变异系数进行比较。

   慢波频率变异系数（%）=慢波频率标准差/慢波频率均值×100%

   慢波振幅变异系数（%）=慢波振幅标准差/慢波振幅均值×100%

2.3 统计学处理

数据以±s表示，采用Excel2007软件进行t检验。

实施例1 便秘小鼠模型的建立 

1.1分组 取小鼠20只，雌雄兼用，称重后随机分成2组，对照组，便秘组，每组10只。

1.2药剂的配制  取2片复方地芬诺酯片加蒸馏水5ml配成混悬液。取2g曙红加10ml蒸馏水配成混悬液。 

1.3建模  试验前24h停食给水，便秘组按10mg/kg复方地芬诺酯混悬液灌胃复制便秘模型。对照组则给水和淀粉的混悬液替代。每天记录小鼠粪便粒数、粪便的形态及小鼠的体重，并根据粪便及体重变化适当增减给药剂量。饲养时间为30天。