[发明专利]多肽类提取物的特征图谱测定方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种多肽类提取物的质量控制方法，具体涉及一种多肽类提取物的特征图谱测定方法。

背景技术：

多组分生化药的主要成分包括多肽，氨基酸，核酸等物质，这些物质在紫外光区，在一定的色谱条件下，其中各个色谱峰的相对保留时间等参数具有一定的特征性。同时，目前对于多组分生化药的质量分析和控制的手段还很落后，质量标准还不完善，对于它的鉴别还多采用茚三酮显色反应，茚三酮反应是指在加热条件下，氨基酸或多肽与茚三酮反应生成紫色化合物的反应，此反应虽然具有灵敏度高的优点，但在应用时却不能够区分不同来源的肽，无法准确反映现有多组分生化药的质量状况。为此，我们将特征图谱方法应用到多组分生化药的鉴别中，从而更全面有效地对此类产品进行质量控制。

发明内容：

本发明的目的是提供一种多肽类提取物的特征图谱测定方法，该方法中供试品特征图谱与标准特征图谱相似度经计算大于0.8，本方法能够区分不同来源的多肽，对于提高此类产品的质量标准，保证药品质量，保障患者用药安全都有重要的意义。

上述的目的通过以下的技术方案实现：

一种多肽类提取物的特征图谱测定方法，该方法包括如下步骤：

（1）取不少于3批的多肽类提取物，加水配成1ml含有多肽类提取物5mg浓度，精密吸取1μl注入液相色谱仪，按照指定色谱条件进行试验，将生成的图谱导入中药色谱特征图谱相似度评价系统，得到标准特征图谱；

（2）取对照品和供试品加水配成适宜浓度的溶液，各精密吸取1μl，分别注入液相色谱仪，按所述的指定色谱条件测定，记录得供试品特征图谱；

（3）通过将供试品特征图谱和标准特征图谱进行相似度比较进行测定。

所述的多肽类提取物的特征图谱测定方法，所述的指定色谱条件为：高效液相色谱法测定，色谱柱选择C8，C18，ACQUITYULC HSS T3或同类型BEH柱，流动相A：1‰~1%三氟乙酸水溶液，流动相B：水、乙腈或甲醇、三氟乙酸或甲酸的比例为：400~100：100~400：0~1梯度洗脱，检测波长为210~390nm，柱温20~55℃，理论塔板数按对照品峰计算应不低于5000。

所述的多肽类提取物的特征图谱测定方法，所述的梯度洗脱为：0到4.5分钟流动相A体积比为98%，流动相B的体积比为2%；4.5到7.5分钟流动相A体积比由98%线性下降到70%，流动相B体积比由2%线性上升到30%；7.5到8分钟流动相A体积比由70%线性上升到98%，流动相B体积比由30%线性下降到2%；8到10分钟维持上述比例进行洗脱，总洗脱时间为10分钟；流速为0.2~0.7ml/min。

所述的多肽类提取物的特征图谱测定方法，供试品特征图谱与标准特征图谱相似度大于0.8。

有益效果：

本发明能够对不同来源的多肽，尤其是从动物骨骼，内脏，腺体提取的动物源性多肽进行区分，依据此方法可以进一步提高多组分生化药的质量标准，对多组分生化药的质量起到一定的控制作用。

附图说明：

附图1是标准特征图谱。

其中参数设置为：积分参数：峰宽4.90 阈值 4.80 积分时间1.0~5.0

相似度计算参数：自动匹配时间漂移1.0

具体实施方式：

实施例1：

一种多肽类提取物的特征图谱测定方法，该方法包括如下步骤：

（1）取不少于3批的多肽类提取物，加水配成适宜浓度，精密吸取1μl注入液相色谱仪，按照一定色谱条件进行试验，将生成的图谱导入中药色谱特征图谱相似度评价系统，得到标准特征图谱；

（2）取对照品和供试品加水配成适宜浓度的溶液，各精密吸取1μl，分别注入液相色谱仪，按一定的色谱条件测定，记录得供试品特征图谱；

（3）将供试品特征图谱和标准特征图谱进行相似度比较。