[发明专利]蜂胶抗粉尘螨过敏活性物质的分离方法

说明书

技术领域

本发明涉及蜂胶的深度利用，更具体地说，本发明涉及蜂胶活性物质的提取方法以及蜂胶活性物质在抑制粉尘螨过敏原中的应用领域。

背景技术

蜂胶英文Propolis来源于古代希腊语，是由pro（在前方）和“lis”（城堡）组成，含义是蜂胶有缩小蜂巢入口的作用(Castaldo and Capasso 2002)。蜂胶一般是由工蜂采集植物的嫩芽、嫩枝，再混以树胶、花粉、蜂蜜等物质送至蜂巢，经由内勤蜂的舌腺、蜡腺等腺体加工转化而形成的不透明胶体状物质，多呈棕褐色、灰褐色、黄褐色、灰绿色、暗绿色，极少数呈深黑色(Rak1996)。由于蜂巢内部空间狭小、潮湿的特性使其有利于微生物的生存，内勤蜂便将蜂胶涂抹于蜂巢缝隙或其他需要的地方，以阻止外部细菌的进入、风干入侵者尸体，保证蜂巢内部环境的整洁，有利于蜂王浆、花粉等蜂产品的保存。

蜂胶作为一种汇集了动植物的多种产物和次级代谢产物而存在的天然物质，成分极为复杂（见下表1-1）。现阶段已经分离鉴定出的蜂胶成分达三百多种，其中黄酮类物质71种，氨基酸25种，芳香族酸、酯类59种，以及多种酯、醛、醇类化合物，还有多种维生素和铁、锌、镉等微量元素。化学成分的多样性赋予了蜂胶丰富的生物学活性，目前蜂胶已经被证实的生物学活性主要有抗肿瘤、抗氧化、抗菌消炎、护肝等生物学活性，还有资料显示蜂胶制剂对呼吸道疾病、皮肤疾病、心血管疾病等方面的疾病有显著疗效。

蜂胶资源稀少，一个五六万只得蜂群蜂胶的年产量仅为100多克，因此国外市场称蜂胶为“紫色黄金”。据调查1支浓度为25%、净含量为30g的蜂胶口服液在美国市场上的零售价为30美元左右，1支普通的蜂胶口服液（15ml,20g）的售价也在20美元以上，尤其是巴西蜂胶在世界上享誉盛名，其相关商品售价远远高于其他产地蜂胶产品，也已经分离出多种具有生物活性的化学成分。

表1-1蜂胶的主要成分列表

中国蜂胶研发起步较晚，早期主要以原材料的形式出口，加工利用率和附加值均较低。但是中国蜂胶相对于外国蜂胶而言具有储量大、分布范围广等资源优势。自2005年起蜂胶被列入《药典》后，蜂胶被广泛应用于在医疗卫生、食品贮藏加工、日用品加工和中医药等方方面面。加大中国蜂胶的活性成分研究，开发具有实际应用价值的蜂胶产品将会为中国蜂胶的产业化和标准化提供更好的理论依据。

随着现代分析技术的发展，关于蜂胶活性成分的提取、分离与鉴定成为研究的热点。从九十年代至今国内外对中国蜂胶样品的研究报道万余篇，现阶段也已经明确中国蜂胶化学组分和生物学活性具有丰富的多样性。

但是，如上所述，蜂胶的成分复杂，要从中提取出有活性的物质非常困难，本发明人长期致力于蜂胶的深度开发利用，并在长期研究的基础上建立了一套的从蜂胶中提取活性物质的方法体系。而且，在建立优化该方法体系的过程中，意外地发现所提取得到的物质能够有效地抑制粉尘螨过敏原的活性。

众所周知，粉尘螨是一类主要存在于室内尘土中的螨类，在世界范围内有60余种，仅中国就有34种。世界范围内统计结果证明居室内最优势的粉尘螨类是Dermatophagoides farinae品系。由于粉尘螨普遍存在于人类居住环境的灰尘中,可引起人体许多过敏反应如过敏性哮喘、过敏性鼻炎、过敏性皮肤疾患等。因此，粉尘螨越来越得到人们的重视。

粉尘螨过敏原的组成非常复杂，种类繁多。目前国际免疫联合会(1UIS)已经把粉尘螨过敏原进行了归纳和分类，共有14种之多。

粉尘螨属于吸入性过敏原中最重要的一种，当灰尘被扬起时粉尘螨的虫体、尸体、粪便、卵及脱落下的皮壳等过敏原，随之进入人的呼吸系统，进而引发呼吸系统的过敏性疾病。

从粉尘螨过敏原的免疫学参数比较可知，90%以上的粉尘螨过敏患者的IgE检测属于25kDa和14kDa两组过敏原，国际上将这两组最重要的过敏原组分分别命名为DerⅠ和DerⅡ过敏原。针对主要过敏原进行筛选确定和研究不仅有助于粉尘螨引发的过敏性疾病的临床诊断、提高免疫学治疗的安全性，而且有助于阐述粉尘螨的发病机理。粉尘螨引发的过敏性疾病引发的过敏性疾病包括：支气管哮喘、过敏性鼻炎、过敏性皮肤疾病等疾病。

随着人们生活水平的提高、生活方式的变化和环境污染,过敏性疾病的发病率普遍上升。研究发现通过减少环境中的粉尘螨数量，能有效降低儿童和青少年患过敏性疾病的危险，提高免疫治疗的效果。由此为降低过敏反应的发生，就要对粉尘螨相关的指标进行严格干预，如粉尘螨的活体数量、粉尘螨过敏原数量等。