[发明专利]一种碱基修饰金纳米粒子及制备方法

说明书

技术领域

本发明属于复合纳米材料的制备技术领域，具体涉及碱基修饰金纳米粒子的制备 

背景技术

核酸碱基由于其特有的结构特点，能都对很多分子通过氢键进行特异性的作用。金纳米颗粒表面修饰特定的分子结构单元后，再与特定的蛋白、多肽、核酸链以及许多小分子作用后有明显的特征信号出现。这些特征信号的出现对复合纳米金颗粒用于特定的分子检测具有重要意义，而且这些检测具有快速、高效、特征信号强、成本较低的特点，在初筛时可以避免使用HPLC、HPLC-MS、GC-MS方法中用到的昂贵仪器。 

发明内容

本发明的目的是提供一种制备的碱基修饰金纳米颗粒的方法，所制备的金纳米粒子具有较高的检测灵敏度，并且低成本、易操作。 

本发明的一种碱基修饰的金纳米粒子，其特征在于通过合成特定结构的巯基化碱基衍生物，然后将其与金纳米颗粒发生反应。 

具体制备步骤为： 

1)修饰碱基N9位。碱基在碱性条件下与溴代烷烃反应，柱色谱分离得到纯净N9位修饰的碱基衍生物。 

2)巯基化。N9位修饰碱基先用硫代乙酸钾处理，然后用甲醇钠处理，柱色谱分离得到纯净N9位修饰巯基化碱基。 

3)碱基修饰金纳米颗粒制备。取金纳米颗粒溶液10mL与10μL 1mM巯基化碱基室温搅拌进行粒子交换，制得碱基修饰金纳米颗粒。 

本发明与背景技术相比，本发明能够灵活地修饰碱基的特定位置，制备出含不同基团的碱基修饰金纳米颗粒溶液，预计具备较好的对三聚氰胺的识别性能，可降低检测成本，提高检测操作的可行性和可操作性。 

所述结构通式如下： 

本发明所涉及的连接结构如下： 

R＝CH₂，O，N，S

h，m，n为大于0的正整数

本发明中所涉及的碱基结构如下：

具体实施方式

下面通过实施例详述本发明，但不是对本发明的限制。 

实施例1

如结构式所示结构中的一例：2-氨基-9-(3-巯基丙基)鸟嘌呤修饰金纳米颗粒溶液的制备 

(1)2-氨基-6-氯-9-(3-溴丙基)嘌呤的合成。取物质的量比为1∶4∶4的2-氨基-6氯嘌呤、碳酸钾粉末、1，3-二溴丙烷以及适量的丙酮加入烧瓶中，在0-200℃下反应，优选20-100℃，搅拌反应48h，反应结束后将反应液过滤，滤饼用丙酮洗涤3次，合并滤液，减压除去溶剂得到淡黄色出产品，通过柱色谱分离，淋洗剂条件为石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1，得到白色粉末状的2-氨基-6-氯-9-(3-溴丙基)嘌呤，产率为70％.¹H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ：8.15(s，1H)，6.89(s，2H)，4.19(t，J＝8，2H)，3.53(t，J＝8，2H)2.32～2.39(m，2H)；¹³C NMR(DMSO-d6，100MHz)δ：159.72，154.07，149.30，143.14，123.33，41.84，31.56，31.21； 

(2)2-氨基-6-氯-9-(3-硫代乙酰基丙基)嘌呤的合成。取物质的量比为1∶2的2-氨基-6氯-9-(3-溴丙基)嘌呤，硫代乙酸钾和适量DMF做溶剂，反应12hrs，减压蒸馏除去溶剂得到橘红色固体，通过柱色谱分离，淋洗剂条件为石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1，得到橘红色粉末状2-氨基-6-氯-9-(3-硫代乙酰基丙基)嘌呤，产率为75％.¹H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ：8.15(s，1H)，6.92(s，2H)，4.11(t，J＝6.92，2H)，2.84(t，J＝7.08，2H)，2.33(s，3H)，2.00～2.09(m，J＝7.08，2H)；¹³C NMR(DMSO-d6，100MHz)δ：195.01，159.71，154.10，149.29，143.12，123.34，41.98，30.49，29.00，25.43；