[发明专利]一种高糖高脂饲料喂养致生活性高血压动物模型制备方法

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种高糖高脂饲料喂养致生活性高血压动物模型的制备方法，该模型可用于治疗生活性高血压药物的筛选、药理研究及药效评价。

背景技术

人体中引起高血压的原因很多，其中高血压与长期高糖高脂饮食密切相关，经常食用含高糖高脂的食物，会使血脂、胆固醇升高，易形成血栓，同时易引发机体肥胖，产生高血压。机体肥胖，脂肪组织的增多提高了人体对血液的需求，增加了心脏和血管的负担，人体必须升高血压，才能满足机体的供血需求。

目前，尚没有规范地通过长期高糖高脂饮食造成的高血压动物模型。而在药理实验中找到一个最能接近人类高血压形成模型的高血压大鼠模型，寻找引发人体高血压的确切因素及相应的症状指标，从而找到治疗人类高血压更有效的药物，具有非常重要的意义。目前实验室常见的高血压大鼠模型有自发性高血压大鼠、两肾一夹型高血压大鼠模型等，但未见贴近人类高血压形成病机的动物模型，本发明根据人类日常生活中，人体高血压形成诱因——长期高糖高脂饮食，建立了一种可用于治疗生活性高血压药物的筛选、药理研究及药效评价研究的动物模型。

发明内容

本发明的目的是建立一种用于治疗高血压药物筛选、药理研究及药效评价的生活性高血压动物模型的制备方法。为了解决上述技术问题，本发明通过以下技术方案实现：

   正常SD大鼠每天饲养高糖高脂饲料（蔗糖5%～15%、猪油5%～15%、胆固醇0.5%～5%、胆盐0.2%～2%、剩余为普通饲料），8～17周后，形成生活性高血压动物模型。

其模型筛选指标主要为收缩压、舒张压、平均压，以收缩压为主；同时测血清中丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸转氨酶、γ-谷氨酰转肽酶、碱性磷酸酶、葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯、尿酸、肌酐、钾、钠、氯、总钙离子的含量和尿液中肌酐、尿酸等为铺，以监测长期食用高糖高脂饲料对大鼠血压及肝、肾等脏器功能的影响。

具体实施方式

实施例1 

1 实验材料与仪器

1.1动物 SD大鼠，雌雄各半，体重180～220g，20只。许可证号SCXK（浙）20080033，由浙江省实验动物中心提供。

仪器  ALC-NIBP无创血压测量分析系统（上海奥尔科特生物科技有限公司）；荷兰威图SELECTRA-E全自动生化仪（荷兰威图公司）；Powerwave340酶标仪（美国Bio-TEK公司）；DH-500K/Na/Cl/Ca/pH电解质分析仪（深圳百康立科技有限公司）。

试剂  丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸转氨酶、γ-谷氨酰转肽酶、碱性磷酸酶、总胆固醇、甘油三酯、葡萄糖、尿酸、肌酐（上海复星长征医学科学有限公司）；BUN试剂盒，南京建成生物工程研究所；A定标/冲洗液、B斜率定标液、去蛋白清洗液，武汉中达生物传感技术有限公司制造。

实验方法

2.1 造模SD大鼠，雌雄各半，体重180～220g，20只。10只作为正常对照组，10只为模型造模组。模型造模组给予高糖高脂饲料（蔗糖5%～15%、猪油5%～15%、胆固醇0.5%～5%、胆盐0.2%～2%、剩余为普通饲料）喂养，≧12周，正常对照组给予普通饲料。实验期间，两组均自由饮水。

测定指标 于造模的0周、8周、17周分别测大鼠收缩压、舒张压、平均压；于造模的5周、8周、10周、12周，分别禁食10 h后采血，采用生化法测定丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸转氨酶、γ-谷氨酰转肽酶、碱性磷酸酶、总胆固醇、甘油三酯、葡萄糖、尿酸、肌酐的含量；同时测血清中钾、钠、氯、总钙的离子含量。于造模的7周、9周、11周、16周，将大鼠放入代谢笼中，自由饮水，检测尿液中肌酐、尿酸的含量。

统计分析　计量资料数据以                                                ± s表示，组间比较采用t-test检验；计数资料采用X²检验。

实验结果

3.1 造模因素对SD大鼠血压的影响

由表1可知，与正常对照组相比，造模第8周开始，模型造模组大鼠收缩压（SBP）明显升高 (P<0.01)。

表1  高糖高脂饲料致生活性高血压大鼠模型实验—收缩压血压统计表（± s，n=10）