[发明专利]大叶小檗酊剂

说明书

技术领域：

本发明公开了一种以东北长白山地区所产大叶小檗(Berberis amurensis Rupr.)块根为主要原料药制备所得治疗口腔溃疡的酊剂，并提供其制备方法，研究表明该药物对常见细菌有较好的抑菌活性。该研究属于生药有效成分提取制备及其在医药与保健品领域的应用方法，并为治疗口腔溃疡药开发提供依据。

背景技术：

口腔溃疡是口腔粘膜疾病中的常见病,也是人类生活中口腔中多发病症，其发病机理常与病毒感染性疾病或与机体免疫功能失调有关。其发病原因复杂，可分为单纯性、复发性、创伤性口疮、疤疹性口炎、糜烂型唇炎、扁平苔癣等，主要与微生物感染、神经精神因素、消化系统功能紊乱、内分泌失调、遗传因素有关，而多数是因为微生物感染导致，其中细菌感染是由溶血性链球菌在抗生素作用下转为无细胞壁的L型菌所引起。因此长期服用抗生素的患者容易患有口腔溃疡。

大叶小檗(Berberis amurensis Rupr.)为小檗科小檗属植物，又名小檗、三颗针。中药主要以其根和根皮入药，是长白山区民间的常用药材。具有抗菌消炎, 解毒清火等功效。小檗属植物以有部分应用于临床治疗口腔炎症，并且疗效显著。

发明内容：

本发明公开了一种以东北长白山地区所产大叶小檗(Berberis amurensis Rupr.)块根为主要原料药制备所得治疗口腔溃疡的酊剂的制备方法，具体如下：

大叶小檗块根粗粉，在无菌条件下，取其粗粉20g置于烧杯中，用适量的70%医用乙醇浸泡，搅拌均匀后密封，浸渍3~5d后过滤，滤液置于100mL容量瓶，用70%医用乙醇定容至刻度，即得酊剂。

本发明公开了一种东北长白山地区所产大叶小檗(Berberis amurensis Rupr.)块根为主要原料药制备所得酊剂的抗菌活性的研究，方法与结果如下：

精密量取大叶小檗酊剂溶液1mL、2mL、3mL，分别相当于原药材0.2g、0.4g、0.6g，以吐温-80与生理盐水混合液为空白对照。

在无菌超净工作台中，精密量取磷酸氢二钾5.6g，磷酸二氢钾0.42g，加入1000mL蒸馏水与其混溶，过滤，在121゜C下高温灭菌30min 后常温下冷却；精密量取磷酸氢二钾2.00g、磷酸二氢钾8.00g，加入1000mL蒸馏水与其混溶，过滤，在121゜C下高温灭菌30min 后常温下冷却；精确量取1.28 mL阿米卡星阳性药置于100 mL容量瓶中，用pH7.8磷酸盐缓冲溶液定容至刻度，使浓度为1.28 mg/mL，密封并冷藏保存。

各转移少量供试菌种于MH培养基中，慢慢摇晃至菌种分布均匀，密封后将菌液置于气浴恒温振荡器中于37℃，200r/min培养，最适培养时间为16-18h。

精确吸取大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、沙门氏菌菌液滴于平板培养基上，每平板需200μl菌液，然后用涂布棒将滴在平板上的菌液慢慢涂匀，备用。然后采用纸片扩散法，分别取用三个供试阳性药浸泡过的圆形滤纸片（纸片直径为7mm，且纸片完全浸透，且无药液滴下为宜），顺时针将其均匀平整的铺放在带有菌液的平板培养基上，做3个平行，密封好后置于CO₂恒温培养箱中，在37℃下培养16～18小时后观察每个平板上的抑菌圈，并用十字交叉法测量其直径，记录好数据，取平均值备用。

精确吸取上述四种供试菌液滴于平板培养基上，采用纸片扩散法，每个平板上铺5张滤纸片，取直径为7mm的无菌圆滤纸片分别蘸取受试样品溶液及阳性药，按顺时针依次为阳性药、受试样品浓度由高到底，中间铺放阴性对照，每个样品做3个平行，密封好后置于CO₂恒温培养箱中，在37℃下培养16～18小时后观察并测量各抑菌圈直径，记录数据。

结果要根据抑菌圈直径（mm）以及抑菌率（％）来判定药物的抑菌活性，抑菌率计算公式为：

所得数据均要用表示，并通过SPSS18.0进行统计分析。当P<0.05时说明该数据在统计学上具有显著性差异，当P<0.01时说明该数据在统计学上呈现极显著差异。