[发明专利]一种生产多不饱和脂肪酸的方法

权利要求书

1.一种生产多不饱和脂肪酸的方法，包括：

（1）菌种活化

将黑曲霉xj菌株接于PDA固体斜面培养基上，27℃静置培养3天，活化3次，保存于4℃冰箱备用；

（2）孢子悬液的制备

将活化好的菌株，用含0.05% 吐温80无菌水洗下孢子，转入带有玻璃珠的100 mL无菌水中，搅拌后再在旋涡震荡器上震荡，充分打散孢子，用4层无菌镜头纸过滤除去菌丝，制成均一孢子悬液；

（3）种子液的制备

    将孢子悬液，以体积比5%接种量接种于100mLPDA液体种子培养基中，27℃，150rpm，摇瓶培养3天，得种子液；

（4）发酵培养

取种子液按体积比5%接种于13L PDA发酵培养基中，28±1°C，搅拌速度200-300rpm，通气量控制在1-2L/min，培养5天终止发酵，4层无菌纱布过滤除去菌丝体，收集发酵液，即得。

2.如权利要求1所述的生产多不饱和脂肪酸的方法，其中PDA固体斜面培养基的制备方法如下：马铃薯200g切块，用水煮沸30min，过滤取汁，加葡萄糖20g，琼脂20g，水补足1000mL，pH自然；灭菌条件：121℃，30min。

3.如权利要求1或2所述的生产多不饱和脂肪酸的方法，其中PDA液体种子培养基的制备方法如下：马铃薯200g切块，用水煮沸30min，过滤取汁，加葡萄糖20g，水补足1000mL，pH自然；灭菌条件：121℃，30min。

4.如权利要求3所述的生产多不饱和脂肪酸的方法，其中PDA发酵培养基的制备方法如下：马铃薯2600g切块，用水煮沸30min，过滤取汁，加葡萄糖260g，水补足13000mL，pH自然，121℃，灭菌30min。