[发明专利]一种基于纸基薄层层析板的样品前处理方法及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及薄层色谱分离领域，具体涉及一种基于纸基薄层层析板的样品前处理方法及其应用。

背景技术

色谱技术是对复杂混合物分离分析最有效的方法。薄层色谱(Thin Layer Chromatography)又称为薄层层析，是属于固-液吸附色谱。其点样斑点小、清晰不扩散、分离时间短、灵敏度高、分离效果好，是近年来发展起来的一种高效、快速而又简单的色谱法。因此，薄层色谱被广泛应用于医药、化工、环保、食品等领域，尤其是对天然化学产物中有效成分的分离和分析发挥着很大的作用。

与纸层析相比，薄层层析具有较好的分离效能，混合物展开分离迅速，一般展开一次约在15-60分钟，分离效能比纸层析好。此外，样品溶液上样量少，一般几微升至几十微升就可以在薄层层析板上很好的分离，且操作简便，不需要特殊昂贵而又复杂的仪器，便于普及。因为薄层层析色谱的固定相物质多为惰性无机化合物，所以可以使用一些腐蚀性显色试剂，这是纸层析法所不能比拟的。另外，薄层色谱的分离容量较纸色谱大，因此可以用作微量物质分离的制备色谱。

作为一种纯化手段，薄层层析色谱与气相色谱、液相色谱、红外光谱等方法联用常见于报道，利用薄层层析色谱做为样品的前处理方法，操作简单，应用广泛。

近年来，食品中农药残留、兽药残留和非法食品添加剂等成为食品安全领域的热点话题。在检测手段上，针对这些问题发展了一系列检测方法，而这些方法中样品的前处理成为一个影响分析质量的重要环节。为提高仪器灵敏度，减少干扰，固相萃取以及凝胶色谱净化等技术在这些样品前处理中被广泛应用并取得极大的发展。然而，尽管当前固相萃取技术已经成为一项相当成熟的样品前处理技术，但本身也一些不足。如需要一定量的溶剂分别完成净化、洗脱的过程，耗材成本较高、溶剂消耗量大、操作过程较为繁琐等。因此，将薄层色谱引入这些样品前处理过程中，可以通过较为简单的薄层层析过程对样品提取液进行净化，以减少溶剂的消耗，极大的降低了检测成本。薄层层析色谱兼备了柱色谱和纸色谱的优点，既能适用于少量样品(几到几百微克，最少甚至0.01微克)的分离，调整吸附层固相物质的量，也可分离较大量的样品，最多可达500毫克。

现有技术中的样品前处理方法中所使用的薄层层析板，不能方便地随意裁减和卷曲折叠，得到样品恒定比移值的条带进行处理时，富集的目标化合物难以被完全洗脱附，不可避免受到其余位置富集物的影响，进而影响了制备效率，难以实现方便快捷的样品前处理。

发明内容

本发明提供了一种基于纸基薄层层析板的样品前处理方法及其应用，所要富集的待测组分能够有效集中在条带恒定比移值位置，且富集区域的色谱条带可以按需要剪切下来，用有机溶剂提取待测组分，然后用气相色谱等仪器进行定量分析，重现性好，并可同时分析多个样品，快速高效地完成对复杂样品的净化和待测物的富集。

一种基于纸基薄层层析板的样品前处理方法，包括如下步骤：在纸基薄层层析板底部位置负载待测样品浓缩液，将纸基薄层层析板放入展开槽，加入展开剂进行薄层层析分离，剪切下恒定比移值位置的目标检测物条带，提取待测物，完成所述的样品前处理。

所述的待测物即为采用本发明的前处理方法对被检样品进行处理得到的。在固定的层析条件下，待测物在纸基薄层层析板上的比移值是恒定的，这一点可以通过预先的实验获得，在之后的前处理过程中，直接在预定位置剪切下对应部分的纸基薄层层析板(剪切下恒定比移值位置的目标检测物条带)即可。

所述的纸基薄层层析板包括纸基板和涂布在纸基板上的涂布层；所述的纸基板为至少一面覆盖有聚乙烯膜的纸；所述的涂布层涂布在纸基板的聚乙烯膜上。

所述的纸基板的厚度为0.10～0.30mm，所述的涂布层的厚度为0.20～1.00mm。

所述的涂布层采用涂布液制成，该涂布液各组分的质量百分比组成为粘合剂0.75％～7％，吸附剂12％～33.25％，水65％～85％。

所述的粘合剂为聚乙烯醇、羧甲基纤维素钠、淀粉中的一种或多种，可以使吸附剂牢固地涂布在纸基板上，提高层析板的机械强度。

所述的吸附剂为硅胶、硅藻土、氧化铝、硅酸镁、硅酸钙、碳酸锌或玻璃粉，吸附剂的粒径为150目～200目，可以提高分离效果。