[发明专利]一种琥珀酸-Q还原酶酶活性检测方法和试剂

权利要求书

1.一种琥珀酸-Q还原酶活性测定方法，其特征在于它的原理如下：

琥珀酸-Q还原酶在特定条件下能够将琥珀酸中的电子转移给氧化型辅酶Q（CoQ）生成还原型CoQ，还原型CoQ进一步将电子转移给电子受体R生成还原型的R；还原型的R在特定的激发波长下可以发射出特异波长的荧光，因此在特定的条件下可检测到还原型R的荧光值，由于琥珀酸-Q还原酶催化底物反应的速率与还原型R的生产量成正比，因此检测在特定波长下的还原型R的荧光值的变化，就可以计算出琥珀酸-Q还原酶的酶活力。

2.如权利要求书1所述的电子受体R，其特征在于：它是一种在物理和化学领域普遍被接受的任何能在氧化还原反应中被还原的荧光染料分子，氧化型R被琥珀酸-Q还原酶还原后产生还原型的荧光分子R，还原型荧光分子R可以在特定激发光下发射荧光。

3.如权利要求书1-2所述的电子受体R，其特征在于，它常见的代表分子是刃天青（Resazurin），它的结构式为：

一种琥珀酸-Q还原酶活性检测试剂，其特征在于：它是根据权利要求书1所述的原理和方法来开发配制的，它主要用于琥珀酸-Q还原酶的酶活性的分析和检测。

4.如权利要求书4所述的琥珀酸-Q还原酶活性检测试剂，其特征在于：其主要成分包括如权利要求书1-3所述的电子受体R，这种检测试剂主要用于琥珀酸-Q还原酶的酶活性的分析和检测。

5.如权利要求书4-5所述的琥珀酸-Q还原酶活性检测试剂，其特征在于：其主要成分还可以包括电子供体琥珀酸，它也可以是琥珀酸的各种盐化合物；而且还可以包括如权利要求书1所述的辅酶Q（CoQ），即ubiquinone，它可以是辅酶Q的母体分子，也可以是CoQ母体分子的各种衍生物或修饰物，如CoQ1、CoQ2、CoQ10、Decylubiquinone 等醌类化合物。

6.如权利要求书4-6所述的琥珀酸-Q还原酶活性检测试剂，其特征在于：其成分中还可以包括抑制剂，这种抑制剂是在酶学上普遍被接受的各种能够抑制琥珀酸-Q还原酶酶活力的试剂或分子。

7.如权利要求书4-6所述的琥珀酸-Q还原酶活性检测试剂，其特征在于其成分还可以包括缓冲液和稳定剂，所述的稳定剂是被物理、化学和酶学上普遍接受和使用的各种表面活性剂；所述的缓冲液中的缓冲试剂是被物理、化学和酶学上普遍接受的能将体系的pH值缓冲或稳定6.0—9.0的范围中的试剂，这种检测试剂主要用于琥珀酸-Q还原酶的酶活性分析和检测。

8.一种琥珀酸-Q还原酶活性检测试剂，其特征在于：它是基于权利要求书1-8所述的原理、方法和试剂的基础上开发配制的，其主要成分包括：

   如权利要求书8所述的缓冲液                   10—1000mmol/L

   pH范围                                             6.0—9.0

   如权利要求书8所述的稳定剂                      0.01%—10%

   如权利要求书6所述的CoQ                     0.005—2mmol/L

   如权利要求书6所述的琥珀酸（盐）                0.5—50mmol/L

   如权利要求书7所述的抑制剂                      0—20mmol/L

   如权利要求书1-3所述的电子受体R              0.002—10mmol/L

这种检测试剂主要用于琥珀酸-Q还原酶的酶活性分析和检测。

9.根据权利要求9所述琥珀酸-Q还原酶活性检测试剂，其特征在于：由缓冲液、稳定剂、CoQ、琥珀酸（盐）、抑制剂、R组成双剂试剂；试剂1，由缓冲液、稳定剂、CoQ、琥珀酸（盐）、R组成；试剂2，由抑制剂组成。

10.根据权利要求9所述琥珀酸-Q还原酶活性检测试剂，其特征在于：由缓冲液、稳定剂、CoQ、琥珀酸（盐）、抑制剂、R组成组成三剂试剂；试剂1，由缓冲液、稳定剂、CoQ、琥珀酸（盐）组成；试剂2，由缓冲液、稳定剂、R组成；试剂3，由抑制剂组成。