[发明专利]一种北冬虫夏草无公害栽培方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种北冬虫夏草无公害栽培方法。

背景技术

 蛹虫草，属于子 囊 菌 亚 门 ( Ascomycotina ) ， 麦 角 菌 科( Clavicipitaceae) ，虫草属( Cordyceps)，又称北冬虫夏草，是我国和世界比较著名的食药用真菌，具有滋肺益气、增精益肾、止血化痰、抑制肿瘤、延缓衰老、提高机体免疫力之功效。虫草以其较好的抗肿瘤、抗病毒、抗菌消炎、抗疲劳及增强机体免疫力等作用愈来愈受到人们的关注。大量的药物化学、物理及临床研究表明,蛹虫草的药效与冬虫夏草极为相似,其主要药用成分虫草素、虫草酸、虫草多糖含量及SOD活性等均高于冬虫夏草,因此其可用作冬虫夏草的替代品。但由于蛹虫草野生资源极少,天然药材来源十分有限,价格昂贵,因此人工栽培蛹虫草具有特殊的意义。但是，随着冬虫夏草用途的日益广泛，用量越来越大，导致冬虫夏草资源的过度采集和野生资源枯竭。为了更好地满足社会对虫草的需求，国内外学者纷纷开展了人工培育虫草的研究。目前，蛹虫草的栽培以蚕蛹和大米、小麦等麦粒培养基栽培为主，并取得广泛的发展。

发明内容

本发明的目的之一是通过以下技术方案来实现的：

菌种活化：将冰箱保存的斜面菌种采用固体培养方法或液体发酵方法进行活化培养，25 ℃静置培养 48 h得到活化菌种；固体培养方法按PDA 综合培养基配方配制，高压灭菌后制斜面，将保藏的菌种接入新制的培养基中，将接好的菌种置于25℃恒温箱中培养，至洁白的菌丝体长满试管斜面；液体发酵方法将PDA 斜面培养基上经过活化的蛹虫草菌种，接入上述5 种液体培养基中在 25℃、 130 r·min^-1、 光照 12 h 的条件下进行摇瓶发酵。培养基的制备：每栽培盒装大米300 g、玉米粗粉20g, 蚕蛹粉0.156 g/g，然后用聚丙烯薄膜包扎，在 121℃ 灭菌 1. 5h，每盒接入液体菌种 100ml，使菌种均匀覆盖培养基表面，然后将栽培盒移入恒温 25℃ 进行培养，基质含水率64%~ 69%,优选66.75%。发菌条件: 温度15~18℃,空气相对湿度70%~80%,光照强度300~400lx;转色与原基形成条件:温度18~21℃,空气相对湿度85%~95%,光照强度800~1000lx;子座生长条件:温度15~18℃,空气相对湿度85%~95%,光照强度800~1000 lx;所有栽培瓶随机堆放,并定期调换堆放位置,保持温度、光照均匀,整个培养过程保持栽培室内空气新鲜;移栽：待菌丝长满后，将栽培盒移入出草室内，在薄膜中央扎 4～6 个孔，保持相对湿度 58% ~95% 和足够的散射光，维持温度 20℃，待子实体长至 5 ~8cm，上部布满颗粒状的子囊时采收，然后用已灭菌的镊子清理干净出草面，每盒加 30ml 无菌水，盖好薄膜，继续培养15d，出第 2 茬。

具体实施方式

以下将对本发明的优选实施例进行详细的描述；应当理解，优选实施例仅为了说明本发明，而不是为了限制本发明的保护范围。

菌种活化：将冰箱保存的斜面菌种采用固体培养方法或液体发酵方法进行活化培养，25 ℃静置培养 48 h得到活化菌种；固体培养方法按PDA 综合培养基配方配制，高压灭菌后制斜面，将保藏的菌种接入新制的培养基中，将接好的菌种置于25℃恒温箱中培养，至洁白的菌丝体长满试管斜面；液体发酵方法将PDA 斜面培养基上经过活化的蛹虫草菌种，接入上述5 种液体培养基中在 25℃、 130 r·min^-1、 光照 12 h 的条件下进行摇瓶发酵。培养基的制备：每栽培盒装大米300 g、玉米粗粉20g, 蚕蛹粉0.156 g/g，然后用聚丙烯薄膜包扎，在 121℃ 灭菌 1. 5h，每盒接入液体菌种 100ml，使菌种均匀覆盖培养基表面，然后将栽培盒移入恒温 25℃ 进行培养，基质含水率64%~ 69%,优选66.75%。

发菌条件: 蛹虫草的各个生长发育阶段都有最适温度及温度的上下临界点，是其生长过程中重要的环境因子之一。接种、养菌时需控制在18 ℃以内；菌丝体的生长温度在 6～30 ℃，低于6 ℃或高于 30 ℃停止生长 ，甚至死亡 ，最适生长温度为18～22 ℃；子实体最适生长温度为 16~23 ℃，高于 25 ℃或低于10 ℃时停止生长 ；原基分化时需保持 5~10 ℃的温差刺激。实际生产中，一般的温度控制范围为：发菌 15～20 ℃、出草16～23 ℃、长草 20~25 ℃。在栽培时遇养菌期或出草期室内温度偏高，则宜采用空调降温，以减少真菌和细菌的感染，并在催草期、出草期要将增氧、增光、补水、通风和变温等措施协调到位，以达到优质高产的目的，温度15~18℃,空气相对湿度70%~80%,光照强度300~400lx;转色与原基形成条件:温度18~21℃,空气相对湿度85%~95%,光照强度800~1000lx;子座生长条件:温度15~18℃,空气相对湿度85%~95%,光照强度800~1000 lx;所有栽培瓶随机堆放,并定期调换堆放位置,保持温度、光照均匀,整个培养过程保持栽培室内空气新鲜;移栽：待菌丝长满后，将栽培盒移入出草室内，在薄膜中央扎 4～6 个孔，保持相对湿度 58% ~95% 和足够的散射光，维持温度 20℃，待子实体长至 5 ~8cm，上部布满颗粒状的子囊时采收，然后用已灭菌的镊子清理干净出草面，每盒加 30ml 无菌水，盖好薄膜，继续培养15d，出第 2 茬。