[发明专利]一种酒饼簕碱的分离纯化方法

说明书

技术领域

本发明属于植物有效成分提取技术领域，涉及一种酒饼簕碱的分离纯化方法。

背景技术

酒饼簕碱（Atalaphyllinine），分子式为C₂₃H₂₃NO₄，分子量为377.44，mp.205-207℃，是从单叶酒饼簕Atalantia monophylla的根中提取分离的一种吖啶酮类生物碱。实验研究表明，酒饼簕碱具有抗疟活性：体外10μg/ml时，对约尔疟原虫(Plasmodium yoelii)的抑制率为94±4%(同氯喹二磷酸盐)；小鼠腹腔注射50mg/kg时，对疟原虫(P.berghei和P.vinckei)有明显预防作用。酒饼簕碱还具有抗癌作用，能抑制鼠白血病细胞L1210的生长，ED₅₀为1.0μg/ml。

目前，国内尚未见酒饼簕碱的提取纯化方法方面的报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种酒饼簕碱的分离纯化方法，该方法能够提取分离得到高含量的酒饼簕碱晶体，方法简单可行、晶型好。

本发明的分离纯化技术方案如下：

（1）单叶酒饼簕根用5-12倍90%乙醇溶液，25-55℃下进行连续逆流超声提取20-120min，提取液浓缩干燥，得到乙醇提取物；

（2）乙醇提取物用pH2-3的酸水溶解，过滤；

（3）滤液用浓氨水或氢氧化钠水溶液调pH9-11，用氯仿萃取；

（4）萃取液浓缩，注入制备型高效液相色谱仪，得到酒饼簕碱产品。

所述步骤（1）中超声频率为30-80KHz。

所述步骤（2）中酸水为盐酸水溶液。

所述步骤（4）中制备液相的流动相为乙腈-0.05%乙二胺水溶液，体积比为43：57，紫外检测波长为347nm。

本发明的有益效果是：本发明采用连续逆流超声提取，低温提取且提取率高，显著减少了溶剂用量，同时连续化作业；采用制备型高效液相色谱法，分离效果好，上样量大，生产周期短。

具体实施方式

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

实施例1：

将单叶酒饼簕根干燥、粉碎，取5kg，从连续逆流超声提取设备头部进料口进料，从连续逆流超声提取设备尾部溶剂加入口加入12倍90%乙醇溶液，55℃下进行连续逆流超声提取20min，超声频率为80KHz，提取液浓缩干燥，得到乙醇提取物，用pH2的盐酸水溶液溶解，过滤，滤液用浓氨水或氢氧化钠水溶液调pH11，用氯仿萃取，萃取液浓缩，注入制备型高效液相色谱仪，体积比为43：57的乙腈-0.05%乙二胺水溶液为流动相，紫外检测波长为347nm，收集目标流分，浓缩干燥，得到酒饼簕碱576mg，含量95.7%。

实施例2：

将单叶酒饼簕根干燥、粉碎，取5kg，从连续逆流超声提取设备头部进料口进料，从连续逆流超声提取设备尾部溶剂加入口加入5倍90%乙醇溶液，25℃下进行连续逆流超声提取120min，超声频率为30KHz，提取液浓缩干燥，得到乙醇提取物，用pH3的盐酸水溶液溶解，过滤，滤液用浓氨水或氢氧化钠水溶液调pH9，用氯仿萃取，萃取液浓缩，注入制备型高效液相色谱仪，体积比为43：57的乙腈-0.05%乙二胺水溶液为流动相，紫外检测波长为347nm，收集目标流分，浓缩干燥，得到酒饼簕碱543mg，含量97.3%。

实施例3：

将单叶酒饼簕根干燥、粉碎，取5kg，从连续逆流超声提取设备头部进料口进料，从连续逆流超声提取设备尾部溶剂加入口加入10倍90%乙醇溶液，45℃下进行连续逆流超声提取80min，超声频率为50KHz，提取液浓缩干燥，得到乙醇提取物，用pH3的盐酸水溶液溶解，过滤，滤液用浓氨水或氢氧化钠水溶液调pH10，用氯仿萃取，萃取液浓缩，注入制备型高效液相色谱仪，体积比为43：57的乙腈-0.05%乙二胺水溶液为流动相，紫外检测波长为347nm，收集目标流分，浓缩干燥，得到酒饼簕碱572mg，含量95.9%。

实施例4：

将单叶酒饼簕根干燥、粉碎，取5kg，从连续逆流超声提取设备头部进料口进料，从连续逆流超声提取设备尾部溶剂加入口加入8倍90%乙醇溶液，40℃下进行连续逆流超声提取100min，超声频率为40KHz，提取液浓缩干燥，得到乙醇提取物，用pH3的盐酸水溶液溶解，过滤，滤液用浓氨水或氢氧化钠水溶液调pH10，用氯仿萃取，萃取液浓缩，注入制备型高效液相色谱仪，体积比为43：57的乙腈-0.05%乙二胺水溶液为流动相，紫外检测波长为347nm，收集目标流分，浓缩干燥，得到酒饼簕碱557mg，含量96.3%。