[发明专利]紫檀茋抗真菌生物被膜的新用途

说明书

技术领域：

本发明涉及医药技术领域，是紫檀茋在抗真菌生物被膜中的新用途。 

背景技术：

紫檀茋来源于是血竭制品中抗真菌活性成分，属多羟基二苯乙烯类化合物，为白藜芦醇的同系物，其结构如式(I)所示，类白色结晶状粉末，对空气敏感，熔点89～92℃，有着丰富的药用价值，对于癌症，高血压，高血脂的治疗都有一定的效果。北京大学中医药现代研究中心屠鹏飞等有关于紫檀茋抗真菌的报道，(胡迎庆，屠鹏飞，剑叶龙血树中茋类化合物及其抗真菌活性的研究，中草药，2001，32(2)：104-105)，但紫檀茋单用抗真菌生物被膜的研究未见报道。 

生物被膜是一个微生物聚集群体，是微生物不可逆地与无活力物体或活组织表面接触，由自身产生的细胞外基质包裹着活菌细胞形成的微生态，其具有高度耐药性的特异表型，是相对于单个分散游离状态真菌细胞而言的另一种独特的微生物生存方式。从患者体内取出的导管或生物装置表面可见真菌以生物被膜的形式黏附生长。对体外建立的真菌形成生物被膜的模型进行抗真菌药物敏感性实验时发现，菌株对常用药物均表现为高度耐药。因此，以生物被膜形式生长并表现出高度耐药性的体内导管或生物装置相关性真菌感染给临床治疗带来很大难度，迫使临床医师在进行抗真菌治疗的同时必须从患者体内取出导管或生物装置，从而影响到患者的预后。 

我们发现紫檀茋在体外单独使用能有效抑制真菌生物被膜的生长增殖，对已形成真菌生物被膜有很好的抑制作用，至今未见紫檀茋单用抗真菌生物被膜的报道。 

发明内容：

本发明提供一种植物提取成分紫檀茋抗真菌生物被膜的新用途，可用于预防真菌生物被膜的形成和抑制已形成的真菌生物被膜。 

真菌在聚苯乙烯等材料表面形成生物被膜后，对多数抗真菌药耐药，氟康唑单用抗白念珠菌生物被膜的SMIC(Sessile Minimum Inhibitory Concentration)值＞1024μg/ml，两性霉素B单用抗白念珠菌生物被膜的SMIC值为0.25～4μg/ml，具有抗酵母相真菌活性的中药单体化合物大多无抗真菌生物被膜活性。 

经实验证明，紫檀茋在体外具有显著的抗真菌生物被膜活性，不仅能抑制真菌生物被膜的粘附、生长增殖，而且对已形成真菌生物被膜具有抑制作用，SMIC值为8μg/ml～64μg/ml。 

本发明为紫檀茋开辟了新用途，也为抗真菌生物被膜提供了一种有效的抑制剂。 

附图说明：

图1为本发明实施例1中紫檀茋以0～32μg/ml浓度单独使用抑制白念珠菌SC5314生物被膜形成的效果。在图1中，横坐标为紫檀茋浓度(μg/ml)，纵坐标为生物被膜形成率(％)。*代表P＜0.05，**代表P＜0.01，***代表P＜0.001。 

图2为本发明实施例1中紫檀茋以0～64μg/ml浓度单独使用抑制白念珠菌SC5314成熟24h生物被膜的效果。在图中，横坐标为紫檀茋浓度(μg/ml)，纵坐标为生物被膜形成率(％)。*代表P＜0.05，**代表P＜0.01，***代表P＜0.001。 

实施方式： 

以下结合具体实施例，对本发明作进一步说明。应理解，以下实施例仅用于说明本发明而非用于限定本发明的范围。 

实施例1：紫檀茋单用对不同白念珠菌菌株生物被膜的作用。 

材料和方法 

1、试药 

紫檀茋：由中科院广州化学有限公司提供。 

氟康唑：购自Sigma公司。 

两性霉素B：购自生工生物工程有限公司。 

XTT：购自Sigma公司。 

甲萘醌(menadione)：购自Sigma公司。 

二甲亚砜(DMSO)：中国医药(集团)上海化学试剂公司，用前重蒸。 

丙酮：购自Sigma公司。 

紫檀茋用二甲亚砜配成6.4mg/ml溶液，两性霉素B用二甲亚砜配成4mg/ml溶液，氟康唑用二甲亚砜配成102.4mg/ml溶液，受试药物于-20℃保存。实验前，将药物贮存液取出置35℃温箱融化，充分混匀，分别进行药效学实验。 

XTT用灭菌的PBS配成0.5mg/ml的饱和溶液，用0.22μm孔径的滤器滤过除菌，甲萘醌(menadione)用100％丙酮配成10mM溶液，XTT、甲萘醌(menadione)于-80℃保存。实验前，将药物贮存液取出置4℃冰箱、35℃温箱梯度融化，充分混匀，进行药效学实验。 

2、菌株