[发明专利]一种丝状真菌甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因（gpd）的启动子及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体的说是一种丝状真菌甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因(gpd)的启动子及其应用。 

背景技术

丝状真菌不仅是研究真核生物生命规律的重要模式菌株，也是抗生素、酶制剂和有机酸的主要生产者。与细菌及酵母相比，丝状真菌在营养需求、细胞生长、翻译后修饰、蛋白分泌能力等方面具有显著的优势。 

丝状真菌的遗传转化方法已经很成熟，这为外源基因在丝状真菌中的表达提供了前提条件。在丝状真菌中，不论是研究代谢调控路径还是提高代谢产物的含量，通常都需要过量表达相关基因。甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因(gpd)是许多真菌中表达丰度很高的基因，构巢曲霉、卷枝毛霉、假丝酵母等真菌的gpd启动子因具有很高的活性而被用来构建表达载体(Punt，P.J.，Zegers，N.D.，Busscher，M.，Pouwels，P.H.，van den Hondel，C.A.M.J.J.，Intracellular and extracellular production of proteins in Aspergillus under the control of expression signals of the highly expressed Aspergillus nidulans gpdA gene，1991，17，19-33；Wolff，A.M.，Arnau，J.，Cloning of glyceraldehyde-3-pho sphate dehydrogenase-encoding genes in Mucor circinelloides(Syn.racemosus)and use of the gpd1 promoter for recombinant protein production，Fungal Genet.Biol.，2002，35，21-29；Van Bogaert，I.N.A.，De Maeseneire，S.L.，Develter，D.，Soetaert，W.，Vandamme，E.J.，Cloning and characterisation of the glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase gene of Candida bombicola and use of its promoter，J.Ind.Microbiol.Biotechnol.，2008，35，1085 1092)。 

不同真菌gpd启动子的活性有很大差异(Cao，Y.，Jiao，R.，Xia，Y.，Astrong promoter，PMagpd，provides a tool for high gene expression in entomopathogenic fungus，Metarhizium acridum，Biotechnol.Lett.，2012，34，557562；Liao，X.，Fang，W.，Zhang，Y.，Fan，Y.，Wu，X.，Zhou，Q.，Pei，Y.，Characterization of a highly active promoter，PBbgpd，in Beauveria bassiana，Curr.Microbiol.，2008，57，121 126)，因此对于特定真菌最好选择活性比较高的gpd启动子。可供选择的丝状真菌强启动子并不多，当需要在真菌宿主中同时过量表达多种不同的基因时，知道多种功能性启动子是有益的，为防止压制特定转录因子的滴定(titration)，优选使用多种不同的启动子，对每种待表达基因使用一 种特定的启动子。 

发明内容

本发明目的在于提供一种丝状真菌启动子及其应用。 

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为： 

一种丝状真菌甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因(gpd)的启动子，丝状真菌启动子核苷酸序列为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示。 

所述丝状真菌启动子为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示核苷酸序列的互补序列。 

所述丝状真菌启动子为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示具有60％或60％以上的同一性或具有相同功能的核苷酸序列；或