[发明专利]生物组织培养繁育考来木的方法

说明书

技术领域

本发明属于植物快繁方法技术领域，具体为生物组织培养繁育考来木的方法。

背景技术

考来木（Correa carmen）是芸香科考来木属常绿小灌木。该属有11个种，原产澳大利亚，分布较广泛，从南澳大利亚州东南部，维多利亚州西部，新南威尔士州东南部，并持续到昆士兰州东南部，它包括东部塔斯马尼亚州及南澳大利亚袋鼠岛。考来木生长环境类型多样，从沿海沙地到内陆半干旱山地都有分布，有的生长在林下或靠近溪流的阴凉环境中，有的暴露在海岬或沙丘中。

树型不规则，有的直立、有的半匍匐生长。叶片短小，对生，背面多有绒毛，逆光观察时可见半透明的油滴状斑点。花多着生于叶腋处，钟状、灯笼状、长管状或细长管状，长2.5厘米左右，单株花朵数量众多，花瓣顶端多反卷呈星状，花蕊突出花瓣外，花期长，多数品种从夏末开至晚冬、甚至初春。花色多，有火红色、白色、绿色、粉色、橘红色等。在寒冷的冬日，考来木以其浓绿的叶片、纤细可爱的繁花、五彩缤纷的色彩夺人眼球，宛如冬季里的精灵。

考来木属是澳大利亚的特有属，其常绿、冬花、耐盐碱、极抗寒、耐干旱等特性，使得其在城市园林绿化中必然大有用途，但每株引种费高达500元，到目前为止，未见国内其它研究机构或种苗企业有引种及繁育研究报道。本技术在单株选优的基础上，采用直接器官发生形式，通过对培养基成分、激素配比以及培养环境因子的确定，建立了考来木完整的再生体系，以芽繁芽进行组培快繁生产出来的试管苗无变异发生，可以保持母本的优良性状，使得这一昂贵的外来物种得以保存和繁育，为后期的推广应用奠定了技术基础和优质种苗。

发明内容

本发明目的在于提供一种生物组织培养繁育考来木的方法，在离体条件下快速繁殖考来木，且生产的考来木种苗品质高，一致性好。

本发明目的通过下述技术方案实现：一种生物组织培养繁育考来木的方法，选取考来木外植体经表面消毒、初代培养、增殖培养、壮苗培养和生根培养获得再生试管苗，并进行栽种，其按下列步骤进行：

a、所述考来木外植体是选择生长健壮、无病虫害的考来木的带腋芽枝条作为起始外植体，用洗洁精擦洗表面后，流水冲洗20分钟，再进行表面消毒处理；

b、将消毒处理后的外植体接种到初代培养基中，进行初代培养，其中，初代培养基为MS+6-BA0.15～0.25mg·L^-1+NAA0.15～0.25mg·L^-1+蔗糖25～35g·L^-1+琼脂4～12g·L^-1；具体的，在初代培养基中，6-BA的激素浓度可以为0.15、0.18、0.2、0.22、0.25 mg·L^-1，NAA的激素浓度可以为0.15、0.18、0.2、0.22、0.25 mg·L^-1，蔗糖的浓度可以为25、28、30、32、35 g·L^-1，琼脂的浓度可以为4、5、6、7、8、10、12 g·L^-1。

c、将初代培养的无菌苗转入增殖培养基，该增殖培养基为MS+BA0.1～2.5mg·L^-1+NAA0.1～2.5mg·L^-1+蔗糖20～40 g·L^-1+琼脂4～12 g·L^-1，诱导不定芽，具体的，BA的激素浓度可以为0.1、0.2、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mg·L^-1，NAA的激素浓度可以为0.1、0.2、0.4、0.8、1.0、1.2、1.5、2.0、2.5 mg·L^-1，蔗糖的浓度可以为20、25、28、30、32、35、40 g·L^-1，琼脂的浓度可以为4、5、6、7、8、10、12g·L^-1；