[发明专利]用于预防肿瘤复合制剂的冬虫夏草菌丝体多糖提取工艺

说明书

技术领域

本发明涉及预防肿瘤复合制剂，具体涉及一种用于预防肿瘤复合制剂的冬虫夏草菌丝体多糖提取工艺。

背景技术

鉴于肿瘤的高发，而预防、治疗手段有限，以及抗氧化在预防肿瘤中的重要性，目前市场上迫切需要一种复合型制剂，起到预防肿瘤及抗氧化的复合功效。

目前缺乏预防癌症和抗氧化的产品，而且所依据的理论较为单一，缺乏中西医的相互验证：要么依据中医理论发掘传统药方，缺乏现代医学的理论和实验证据支持；难以满足同时预防肿瘤及抗氧化的需求。

现有用于预防肿瘤复合制剂的冬虫夏草菌丝体多糖提取工艺为粗多糖，粗多糖中的成分未进行细分，有的具有免疫刺激作用，有的具有免疫调节作用，混在一起使用，会产生效应抵消，而本发明对冬虫夏草粗多糖的成分进行了细分，以促进肿瘤免疫的单一组分为目标，效果更显著。

发明内容

本发明提供一种用于预防肿瘤复合制剂的冬虫夏草菌丝体多糖提取工艺，此冬虫夏草菌丝体多糖提取工艺，对现有技术中粗多糖中的成分进行细分，筛选出具有促进抗肿瘤免疫细胞增殖的组分，增强了机体抗肿瘤免疫力效果。

为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：一种用于预防肿瘤复合制剂的冬虫夏草菌丝体多糖提取工艺，包括以下步骤：

步骤一、取虫草发酵提取液浓缩而成的菌粉100g，加入4L H₂O，煮沸4h后趁热纱布过滤除去残渣；

步骤二、将经步骤一获得的滤液加热浓缩至1L获得浓缩液；

步骤三、将步骤二的浓缩液收集于1L 烧杯中，70℃水浴浓缩至400ml；

步骤四、将步骤三中浓缩液分装至8个50ml 的离心管中，在4500 rpm离心速率下处理10min，获得水溶性虫草多糖溶液；

步骤五、收集经步骤四溶液中的上清液约400ml，去除不溶性杂质，至2L 烧杯中，缓慢加入4倍体积无水乙醇后静置获得醇沉液；

步骤六、将步骤五的醇沉液分装至40个50ml离心管中，在4500 rpm离心速率下处理10min后将所述各个离心管内醇沉多糖收集至4个50ml离心管中；

步骤七、通过100%乙醇洗经步骤六的所述醇沉多糖2次，真空低温冷冻干燥获得冬虫夏草菌丝体多糖；

步骤八、将步骤七的冬虫夏草菌丝体多糖溶于蒸馏水中，搅拌2小时后，10000rpm离心速率下处理5分钟得到上清液，在此上清液中加入100%乙醇，边加边搅拌，4℃沉淀小时后，再在10000rpm离心速率下处理5分钟沉淀后将此时沉淀物经真空低温冷冻干燥获得所述冬虫夏草菌丝体多糖粉体。

上述技术方案中的进一步改进方案如下：

1、上述方案中，所述步骤二中滤液加热时同时进行搅拌操作。

2、上述方案中，所述步骤二中在70℃水浴中保持时间为24h。

3、上述方案中，所述步骤五中静置温度为4℃，时间为12h。

由于上述技术方案运用，本发明与现有技术相比具有下列优点和效果：

本发明用于预防肿瘤复合制剂的冬虫夏草菌丝体多糖粉体提取工艺，对粗多糖中的成分进行细分，采用多步提取步骤，获得多种组分，并比较不同组分的生理功效，以促进肿瘤免疫的单一组分为目标，使获得的产品在增强抗肿瘤免疫性能方面更显著。

附图说明

附图1为本发明与现有技术在杀伤肿瘤细胞性能方面的比较图。

具体实施方式

下面结合附图及实施例对本发明作进一步描述：

实施例：一种用于预防肿瘤复合制剂的冬虫夏草菌丝体多糖提取工艺，包括以下步骤：

步骤一、取虫草发酵提取液浓缩而成的菌粉100g，此菌粉由虫草发酵液脱水形成，加入4L H₂O，煮沸4h，趁热纱布过滤除去残渣。重复3次；

步骤二、收集所有滤液（约5L）加热浓缩至1L。注意边加热边搅拌，防止粘底；

步骤三、浓缩液收集于1L 烧杯中，70℃水浴浓缩至400ml，在该温度下，溶剂挥发速度较快，温度过高，则会影响多糖活性，防止加热过程中多糖碳化。需要24h；

步骤四、浓缩液分装至8个50ml 的离心管中，4500 rpm离心10min，获得水溶性虫草多糖溶液；