[发明专利]测定尿液肌醇的试剂盒

说明书

[技术领域]

本发明涉及一种医药试剂，具体涉及一种测定尿液肌醇的试剂盒。

[背景技术]

人体内的肌醇主要存在于细胞内(为血液中的数十倍)，以游离状态或磷脂酰肌醇构成成分的形式广泛分布于人体内。磷脂酰肌醇通过受体活化等途径而分解，生成肌醇-3-磷酸，在细胞内发挥“second messenger”的作用。另外，在糖尿病状态(高血糖)下，尤其是神经系统的细胞内肌醇含量减少(山梨醇增加)，最终会导致Na、K-ATPase活性下降，引起神经传导阻滞。

通过测定糖负荷后的尿中肌醇含量，可在无创伤的状态下检测出糖耐量的异常。1858年已有报告显示，糖尿病患者的尿中存在高浓度的肌醇排泄(糖尿病患者高出正常人10倍)，提示可作为糖耐量降低的指标之一。并且，河津等人的报告显示，在75g葡萄糖负荷试验前后，尿中肌醇排泄的增加量(ΔUMI)与糖负荷后的血糖值存在良好的相关性，是可以反映空腹时无法明确糖负荷后高血糖状态的良好指标之一。此外，肌醇与糖尿病性神经损伤及糖尿病性肾病的相关性也越来越受到关注。

目前，肌醇的检测方法多采用高效液相法(HPLC)、气相色谱法(GC)、或质谱法(MS)等方法，除需要昂贵的仪器外，操作繁杂，测试速度慢，且需要有专门人员进行作业。

[发明内容]

本发明为了克服现有技术的不足，提供了一种操作简单、快速、灵敏、准确定量的测定尿液肌醇的试剂盒。

为了实现上述目的，本发明设计了一种测定尿液肌醇的试剂盒，包括试剂R1和试剂R2，其中：

试剂R1，包括缓冲液；Thio-NAD⁺1.0g/L，；稳定剂1.0g/L；防腐剂0.5g/L；

试剂R2，包括缓冲液；NADH 5-6g/L；肌醇脱氢酶50-100KU/L；稳定剂0.1-0.2g/L；防腐剂0.5g/L。

所述试剂R1和试剂R2的PH值分别为5-12。

所述试剂R1中，缓冲液为Tris缓冲液0.1mol/L或MES缓冲液20g/L。

所述试剂R1中，稳定剂为牛血清白蛋白、甘露醇或氨基酸中的一种。

所述试剂R1中，防腐剂为叠氮化钠、硫柳汞或庆大霉素中的一种。

所述试剂R2中还包括螯合剂0.8g/L。

所述试剂R2中，缓冲液为Tris缓冲液0.1mol/L或GOOD缓冲剂10g/L。

所述试剂R2中，稳定剂为牛血清白蛋白、甘露醇或氨基酸中的一种。

所述试剂R2中，防腐剂为叠氮化钠、硫柳汞或庆大霉素中的一种。

所述的螯合剂为乙二胺四乙酸。

本发明同现有技术相比，配制简单、便捷，无需特殊仪器，在临床实验室常见的全自动或半自动生化仪上即可完成操作，整个过程仅需10分钟，大幅度节省了人力与物力，同时使临床上对大量样本进行测定成为可能。将本发明用于测定尿中肌醇的酶循环反应试剂，具有较高的稳定性，可广泛应用于临床诊断，并减少试剂的浪费。

[附图说明]

图1为本发明试剂盒中肌醇溶液与肌醇测定试剂在混合后吸光度的曲线趋势图。

图2为本发明试剂盒测定糖化血清蛋白y＝0.989x+0.726，R²＝0.992时的线性范围。

图3为本发明试剂盒测定糖化血清蛋白y＝1.038x-1.634，R²＝0.991时的线性范围。

[具体实施方式]

下面结合附图对本发明作进一步描述。

实施例1：

采用完成配制后的试剂进行检测，达到了准确度、精密度和线性的设定要求，考虑到试剂储存的稳定性和其中的肌醇脱氢酶、NADH在溶液状态下不稳定，将该产品制成双试剂产品，试剂(R1)与试剂(R2)的溶液状态体积比例为3：1，具体成分分配和配制方法如下：

试剂R1：

试剂R2(冻干粉状态时)

试剂R2a(溶液)

GOOD缓冲剂          10g/L

牛血清白蛋白        1.0g/L

NaN₃                0.2g/L

试剂R2b(冻干粉)

NADH                5g/L

肌醇脱氢酶          50KU/L

试剂R2(溶液状态时)