[发明专利]人树突状细胞肿瘤疫苗及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201210088755.2 | 申请日： | 2012-03-29 |
| 公开（公告）号： | CN102600462A | 公开（公告）日： | 2012-07-25 |
| 发明（设计）人： | 戚春建;宁永玲;王仕忠;钱科卿 | 申请（专利权）人： | 戚春建 |
| 主分类号： | A61K39/00 | 分类号： | A61K39/00;A61P35/00 |
| 代理公司： | 常州市江海阳光知识产权代理有限公司 32214 | 代理人： | 孙晓晖 |
| 地址： | 213003 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 树突 细胞 肿瘤 疫苗 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种人树突状细胞肿瘤疫苗，其特征在于：它是由β-葡聚糖诱导获得。
2.根据权利要求1所述的人树突状细胞肿瘤疫苗，其特征在于它是由以下步骤的方法获得：
①获得CD14+外周血单核细胞和肿瘤抗原；
②用含有GM-CSF和IL-4的培养基培养步骤①获得的CD14+外周血单核细胞100h～140h，获得未成熟人树突状细胞；所述含有GM-CSF和IL-4的培养基中GM-CSF的浓度为80ng/mL～120ng/mL，IL-4的浓度为30ng/mL～70ng/mL；
③用β-葡聚糖诱导步骤①获得的肿瘤抗原负载到步骤②获得的未成熟人树突状细胞内，获得人树突状细胞肿瘤疫苗；所述β-葡聚糖的浓度为80μg/mL～120μg/mL。
3.根据权利要求2所述的人树突状细胞肿瘤疫苗，其特征在于：步骤①中所述的CD14+外周血单核细胞是由血细胞分离机从人外周血中先分离获得外周血单个核细胞，再通过磁珠分选系统从外周血单个核细胞中分选获得。
4.根据权利要求2所述的人树突状细胞肿瘤疫苗，其特征在于：步骤①中所述的肿瘤抗原是通过生物法和/或物理法诱导肿瘤细胞凋亡而获得。
5.根据权利要求4所述的人树突状细胞肿瘤疫苗，其特征在于：所述的生物法是采用抗肿瘤化疗药物处理肿瘤细胞使之凋亡；所述物理法是采用同位素射线照射肿瘤细胞使之凋亡，或者采用紫外线照射肿瘤细胞使之凋亡，或者对肿瘤细胞进行反复冻融使之凋亡。
6.权利要求1所述的人树突状细胞肿瘤疫苗的制备方法，其特征在于具有以下步骤：
①获得CD14+外周血单核细胞和肿瘤抗原；
②用含有GM-CSF和IL-4的培养基培养步骤①获得的CD14+外周血单核细胞100h～140h，获得未成熟人树突状细胞；所述含有GM-CSF和IL-4的培养基中GM-CSF的浓度为80ng/mL～120ng/mL，IL-4的浓度为30ng/mL～70ng/mL；
③用β-葡聚糖诱导步骤①获得的肿瘤抗原负载到步骤②获得的未成熟人树突状细胞内，获得人树突状细胞肿瘤疫苗；所述β-葡聚糖的浓度为80μg/mL～120μg/mL。
7.根据权利要求6所述的人树突状细胞肿瘤疫苗的制备方法，其特征在于：步骤①中所述的CD14+外周血单核细胞是由血细胞分离机从人外周血中先分离获得外周血单个核细胞，再通过磁珠分选系统从外周血单个核细胞中分选获得。
8.根据权利要求6所述的人树突状细胞肿瘤疫苗的制备方法，其特征在于：步骤①中所述的肿瘤抗原是通过生物法和/或物理法诱导肿瘤细胞凋亡而获得。
9.根据权利要求8所述的人树突状细胞肿瘤疫苗的制备方法，其特征在于：所述的生物法是采用抗肿瘤化疗药物处理肿瘤细胞使之凋亡；所述物理法是采用同位素射线照射肿瘤细胞使之凋亡，或者采用紫外线照射肿瘤细胞使之凋亡，或者对肿瘤细胞进行反复冻融使之凋亡。
10.权利要求1或2所述的人树突状细胞肿瘤疫苗在制备抗肿瘤药物中的应用。
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