[发明专利]九华黄精的组培快繁方法有效
申请号: | 201210085056.2 | 申请日: | 2012-03-28 |
公开(公告)号: | CN102630562A | 公开(公告)日: | 2012-08-15 |
发明(设计)人: | 陈伟民 | 申请(专利权)人: | 青阳县九华黄精产业化协会 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 安徽合肥华信知识产权代理有限公司 34112 | 代理人: | 方琦 |
地址: | 242800 安徽省*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 黄精 组培快繁 方法 | ||
1.一种九华黄精的组培快繁方法,其特征是包括下列培养阶段:
1)不定芽的诱导阶段:取幼嫩黄精根状茎,先进行消毒获得无菌材料,再将其接种于诱导培养基上,培养28-32天,培养温度为25+1℃,光照时间为10-12h/天,光照强度为1600lx,获得丛芽,所述的诱导培养基组成为:MS基本培养基+3.0-5.0mg/L6-BA +0.3-0.5mg/L 2,4-D+6-8g/L琼脂+28-32g/L蔗糖,其pH 5.5-6.0;
2)丛芽增殖阶段:将步骤1)所得丛芽切成保留一个顶芽或侧芽的茎段,分别接种于增殖培养基上,培养38-42天,培养温度为25+1℃,光照时间为10-12h/天,光照强度为1600lx,所述的增殖培养基的组成为:MS基本培养基+0.5-0.7mg/L 6-BA+0.1-0.2mg/L IAA+0.1-0.2mg/L NAA+6-8g/L琼脂+28-32g/L蔗糖,pH 5.5-6.0;
3)试管苗培养生根阶段:将所得的单个健壮不定芽从基部剪下,接种于生根培养基上,培养22-26天,培养温度为25+1℃,光照时间为10-12h/天,光照强度为1600lx,培养出生根试管苗,所述的生根培养基组成为:1/2MS基本培养+0.5-0.7mg/L NAA+6-8g/L琼脂+28-32g/L蔗糖,pH 5.5-6.0;
4)炼苗移栽阶段:当试管苗生根后,将培养试管苗的培养瓶塞打开后,置于4000lx左右的光照下炼苗3-4d,取出生根试管苗,洗净培养基,移栽到混和土中,并盖上有机玻璃盖子,移栽后7d内要保持没有直射光照射、温度在20℃以上、湿度在90%以上的环境条件,7d后去盖,即可得到优质黄精种苗,所述的混和土由蛭石、黑土和珍珠岩按比例混合而成,三者的混合比例为蛭石:黑土:珍珠岩=(10-14):(1.5-2.5):1的混和土。
2.根据权利要求1所述的九华黄精组培快繁方法,其特征是:步骤1)中获得无菌材料的具体操作为:
1)取幼嫩黄精根状茎,洗掉泥土,用刀切取带芽根茎于洗洁精水溶液中浸泡5-6min,然后用自来水冲洗干净;
2)再用75%乙醇擦洗黄精根状茎表面,再次用自来水冲洗 ;
3)再在超净工作台中:先用75%乙醇浸泡0.5 min,再用灭菌水冲洗;再用升汞浸泡10min,灭菌水冲洗;最后用无菌滤纸吸干水份,用刀切去伤口坏死部分,接种在诱导培养基上。
3.根据权利要求1所述的九华黄精组培快繁方法,其特征是:所述的诱导、增殖、生根阶段的培养温度均为25℃,光照时间为12h/天,光照强度为1600lx。
4.根据权利要求1所述的九华黄精组培快繁方法,其特征是:步骤4)所述的混合土中添加有铁矿尾矿,混合土各组分的重量比例为:蛭石:黑土:珍珠岩:铁矿尾矿=(10-14):(1.5-2.5):1:(2-3)。
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