[发明专利]医用鱿鱼皮胶原蛋白寡肽凝胶的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种胶原蛋白寡肽凝胶的制备方法，具体涉及一种医用鱿鱼皮胶原蛋白寡肽凝胶的制备方法。

背景技术

随着我国海洋鱿钓业的迅速发展，鱿鱼成为我国主要的水产加工原料。鱿鱼年加工量约为30～40万吨，加工过程中会产生包括头、足、内脏及表皮等废弃物，其中鱿鱼皮占加工量的8％-13％。水产品下脚料的高附加值开发是当前水产加工产业的研究热点。鱿鱼皮中胶原蛋白含量约为其干重的70％-80％，若将抗菌活性强的鱿鱼皮胶原蛋白寡肽提取出来并制备凝胶，将充分提升产品附加值，提高企业的经济效益。

凝胶系指药物与形成凝胶剂的辅料混合制成均一、混悬或乳剂型的乳胶稠厚液体或半固体制剂，药物溶解或均匀分散于凝胶中。一般是利用一些新型的高分子药用辅料如卡波姆、聚乙烯醇、羟甲基纤维素钠等将药物制成凝胶，从而达到提高药物局部浓度、延长药物的释放或扩散过程的目的，现广泛用于缓释、控释系统。目前，卡波姆应用较广，为丙烯酸与烯丙基蔗糖或丙烯基季戊四醇交联的高分子聚合物，以卡波姆为基质的凝胶剂具有释药快、易涂展、无油腻性，对皮肤和黏膜无刺激性、药膜的附着性和均匀性好、干燥快等优点。而目前利用鱿鱼皮制备凝胶尚未见报道。

一个公布日为2011.02.23、公布号为CN 101979654A、名为“一种从鱼皮中提取胶原蛋白的方法”的发明专利公开了一种从鱼皮提取胶原蛋白的方法，主要是通过采用异丙醇脱脂，氯化钠去除非胶原蛋白，醋酸浸提同时加酸性蛋白酶酶解，离心浓缩干燥得到鱼皮胶原蛋白。这种方法只说明了从鱼皮中提取了胶原蛋白，并且并不能对所有海洋生物具有通用性，而对鱿鱼皮的胶原蛋白提取及鱿鱼皮胶原蛋白凝胶的制备并无阐述。

发明内容

本发明的目的是提供一种利用鱿鱼皮制备胶原蛋白寡肽凝胶的方法，此方法不仅解决了目前市场上鱿鱼脚料的利用不当的问题，而且为医药用凝胶提供了良好的来源。

本发明通过以下方案实行：

一种医用鱿鱼皮胶原蛋白寡肽凝胶的制备方法，制备方法包括以下步骤：

(1)原料处理：

将鱿鱼皮用水洗净并切碎，放入浓度为0.7～1.5wt‰NaOH水溶液中，浸泡3～5次，每次浸泡时间为5～8h；然后将鱿鱼皮用水洗净并放入浓度为0.5～1.3wt‰HAc水溶液中，在40～50℃下浸泡3～5次，每次浸泡时间为5～8h；

由于鱼皮中胶原纤维分子间和分子内交联的共价键和非共价键的结构很稳定，所以需进行碱处理以打破这种稳定结构，使胶原分子得以释放，同时除去鱼皮中的非胶原杂蛋白，以提高胶原蛋白含量，NaOH溶液用来破坏胶原纤维分子间和分子内交联的共价键和非共价键的稳定结构很，并脱除鱼皮中的杂蛋白，0.7～1.5wt‰这个浓度不仅能够去除杂蛋白，且能保护胶原蛋白不受损失。HAc的目的是为了去除鱿鱼皮上的脂肪并对鱿鱼皮进行溶胶。

(2)胶原蛋白肽制备：

将经步骤(1)处理后的鱿鱼皮放入鱿鱼皮重量3～5倍的水中，调节温度为40～60℃，调节pH值为6.0～8.0，然后向水中加入鱿鱼皮重量3～5％的碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶或胰蛋白酶，恒温5～9h，然后灭酶并离心分离，取上清液，即为酶解液；酶解液通过截留分子量为1000Da的超滤膜进行超滤，接着将酶解液进行真空浓缩脱色和低温真空干燥，得到胶原蛋白肽；

分子量小于1000Da的肽具有更高的抗菌活性，经过截留分子量为1000Da的超滤膜超滤后，得到的肽基本为寡肽。

(3)胶原蛋白寡肽凝胶制备：

按重量份数计，取2～4份卡波姆、14～17份甘油、0.2～0.4份十二烷基磺酸钠、0.2～0.6份对羟基苯甲酸乙酯和50～60份水配置成凝胶基质，然后对凝胶基质进行灭菌，最后将18～22份步骤(2)得到的胶原蛋白肽加入到灭菌后的凝胶基质中，搅拌均匀，即得到胶原蛋白寡肽凝胶。

卡波姆为丙烯类聚合物，含有很多羧基，通过在水中溶胀，配置成凝胶基质，为胶原蛋白肽提供媒介。

作为优选方案，步骤(1)中首先将鱿鱼皮用浓度为3～10wt％的盐水浸泡10～20min。盐水可以去除鱿鱼皮上的油渍等杂质，排出杂质对效果的影响。

作为优选方案，酶解液在进行真空浓缩时的浓度为20～40波美度时，加入酶解液重量0.2～4％的活性碳，40～60℃下脱色0.8～1.2h，并过滤去除活性碳。在浓度为20～40波美度进行脱色，效果会更加显著。40～60℃下进行脱色不会破坏酶解液中酶解物的结构，且有较高的脱色速度。