[发明专利]一种β‑葡聚糖、其提取方法及用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种β-葡聚糖，其提取方法及其用途，具体而言，本发明涉及一种从灰树花子实体中提取得到的一种β-葡聚糖，其提取方法，以及其在制备用于治疗或预防肿瘤或抑制肿瘤生长的药物中的用途。

背景技术

自从1971年美国总统尼克松签署《国家癌症法》向癌症宣战四十年以来，虽然癌症的研究和防治取得了很大的进步，但目前癌症始终还是一种严重威胁人类健康的主要疾病^[1]。根据世界卫生组织WHO的统计，全球每年癌症患者的死亡人数高达六百万，继心血管疾病、传染性和寄生虫病之后位居第三位，并且在2015年将屈居第二^[2]。

对于癌症(恶性肿瘤)的治疗，由于传统的放疗和化疗往往会具有常见的骨髓抑制、免疫抑制、白细胞减少等血液系统毒性。而近几年来出现的包括细胞治疗，疫苗治疗，抗体药物治疗等在内的免疫治疗(Immunotherapy)作为继手术、化疗和放疗之后的第四种癌症治疗方式将逐步成为癌症治疗的主要手段^[3]。而其中利用真菌提取的多糖(尤其是β-葡聚糖)作为典型的生物反应调节剂(Biological Response Modifiers，BRM)^[4]或者免疫调节剂(Immunomodulator)通过动员机体免疫系统间接达到抗肿瘤的作用越来越受到重视，并且在合并放、化疗来联合治疗肿瘤将更有其临床应用价值。

现有的研究表明，多糖尤其是β-葡聚糖，在机体内主要通过结合免疫细胞表面的模式识别受体(Pattern Recognition Receptors，PRRs)进而激活信号传导，并最终促进巨噬细胞、NK细胞、中性粒细胞以及CTL细胞的活化和增殖，从而实现对肿瘤细胞的细胞免疫清除。同时多糖还能通过诱导释放细胞因子(如TNF-α)以及激活补体系统而对肿瘤细胞进行体液免疫清除。目前发现的PRRs包括Dectin-1、补体受体3(CR3)、清道夫受体(Sc)、乳糖基神经酰胺受体(LacCer)以及Toll样受体(TLRs)等^[5]。

灰树花，在日本称为“舞茸(Maitake)”，是一种药、食兼用蕈菌，属担子菌亚门层菌纲目多孔菌科树花菌属。野生的灰树花主要产于日本，在封建社会日本的民间主要由于其极佳的美味而用于烹调食材。直到上世纪八十年代，日本学者才对其中提取的多糖及其免疫调节抗肿瘤的药用价值进行了深入研究^[6]。Mizuno等曾经从灰树花的子实体中分离得到29个多糖组分，其中有20个具有抗肿瘤作用^[7]，而对灰树花的多糖组分及其抗肿瘤作用研究的最多的主要是有两种：Grifolan(GRN)和MD组分。在20世纪80年代，Ohno等从灰树花的子实体，培养的菌丝体以及液体培养基中分离得到了具有同样结构的每三个单元就连接一个1，6-β分支的β-(1，3)葡聚糖，命名为Grifolan(GRN)^[8]。体外和体内研究表明GRN具有很强的抗肿瘤作用并且是通过激活补体系统，诱导巨噬细胞产生细胞因子以及合成NO等免疫调节作用来实现的^[9]。但是GRN在动物实验中口服给药并没有体现抗肿瘤效果^[10]。随后，Namba等通过专有的提取工艺从灰树花中分离得到了一种口服有效的MD组分^[11]。MD组分由β-1，3分支的β-1，6葡聚糖，β-1，6分支的β-1，3葡聚糖以及蛋白质组成，糖和蛋白的比例在80∶20～99∶1之间。研究表明MD组分通过激活宿主免疫系统实现抗肿瘤作用，它能激活巨噬细胞，树突状细胞以及自然杀伤NK细胞同时诱导Th1主导的反应^[12]。另外，MD组分还能通过诱导脐带血细胞以及骨髓细胞产生G-CSF增强生血作用以减少化疗药物阿霉素的副作用^[13]以及动员粒细胞治疗环磷酰胺诱导的粒细胞减少症^[14]。目前，MD组分在I/II期临床实验的乳腺癌患者身上也体现了免疫效果和抗肿瘤作用^[15]。除此之外，也有很多从灰树花中分离得到的组分具有抗高血压，抗糖尿病，抗高胆固醇，以及抗HIV，HBV感染的报道^[16]。

本发明则利用一种简单有效的分离纯化方法，从灰树花子实体中提取获得了一种均一的全新结构的β-葡聚糖(GFPBW2)，并对其免疫调节和抗肿瘤作用进行了研究。

主要参考文献：