[发明专利]体外无血清成体干细胞放大培养的方法及其培养液

权利要求书

1.一种体外无血清成体干细胞放大培养的方法，其特征在于，该方法包含下列步骤：

步骤一：提供人体组织；

步骤二：以酵素水解步骤一所得的组织，并以离心方式将未水解的组织与人类成体干细胞予以分离；

步骤三：将步骤二所得人类成体干细胞于含有自体生长因子的无血清干细胞培养液中进行初代培养；

步骤四：取出步骤三中初代培养液中的黏贴型细胞，于含有自体生长因子的无血清干细胞培养液进行继代培养，以完成人类成体干细胞放大培养。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述人体组织选自于脐带、骨髓、胎盘、脂肪、血液或乳牙所组成的群组。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，用以水解人体组织的酵素为胰蛋白分解酵素或胶原蛋白分解酵素。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述初代培养的步骤进行3至15日。

5.如权利要求1项所述的方法，其特征在于，所述含有自体生长因子的无血清干细胞培养液，是添加分离自自体血液的自体生长因子于无血清干细胞培养液中。

6.如权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，所述自体生长因子添加于无血清干细胞培养液的体积比例为0.1～10％。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤还包含：以流式细胞仪确认初代培养及继代培养的人类成体干细胞的表面抗原标记特征。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，经过继代培养后的人类成体干细胞仍保持在实质未分化的状态。

9.一种培养人类成体干细胞的无血清成体干细胞培养液，其特征在于，包含自体生长因子及无血清干细胞培养液所制得者。

10.如权利要求9所述的培养液，其特征在于，所述含有自体生长因子的无血清干细胞培养液，是添加分离自自体血液的自体生长因子于成体干细胞培养液中。

11.如权利要求9所述的培养液，其特征在于，所述自体生长因子是由人类自体血液分离纯化后所获得的。

12.如权利要求9所述的培养液，其特征在于，用以进行人类成体干细胞的初代培养及继代培养。

13.如权利要求9所述的培养液，其特征在于，所述自体生长因子添加于成体干细胞培养液的体积比例为0.1～10％。

14.如权利要求9所述的培养液，其特征在于，所述人类成体干细胞选自于脐带血干细胞、骨髓干细胞、胎盘干细胞、脂肪间叶干细胞、人类血液细胞或乳牙干细胞所组成的群组。

15.如权利要求9所述的培养液，其特征在于，经过继代培养后的人类成体干细胞仍保持在实质未分化的状态。