[发明专利]一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法

说明书

技术领域

本项发明涉及一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法。

背景技术

目前对糖化血红蛋白的检测一直都存在检测通量低，成本高或者准确度低的情况。

例如免疫法的准确度较差，成本也比较高；离子交换色谱方法准确度很高，但是没有办法实现高通量测试，而且实验成本也很高，普通病人难以接受。本发明旨在建立一套高通量，高速度，能够同时检测多个样品的阵列毛细管电泳方法，以满足糖化血红蛋白检测的要求。

多通道毛细管电泳技术已经成功应用于DNA测序系统，但是将多通道毛细管电泳系统用于糖化血红蛋白HbAlc指标检测在国内尚无报道；目前国内，已有将单根毛细管电泳方法用于糖化血红蛋白HbAlc检测的报道，但此方法通量过低，无法满足大量样本检测的要求。本方法将科研工作中使用的多通道毛细管电泳技术与单道毛细管电泳糖化血红蛋白检测技术结合在一起，既解决了糖化血红蛋白HbAlc检测的难题，又大大提高了检测的通量与速度，满足了检测实验室的要求。

发明内容

本发明用于糖化血红蛋白HbAlc相对含量测定高通量及快速测定。本发明使用多根毛细管的阵列作为分离通道可以同时对多个血液样品中的糖化血红蛋白HbAlc进行分析和检测，并自动对结果进行分析，生成报告。

本发明提供一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法，使用阵列毛细管和光阵列检测装置同时对多个样品进行糖化血红蛋白HbAlc检测。

优选的，所述检测方法包括以下步骤：

1)将分离缓冲液充入阵列毛细管中的各毛细管中作为分离环境；

2)将各样品同时加入到阵列毛细管中的各毛细管的前端；

3)当样品进入毛细管阵列中的各毛细管前端后，将阵列毛细管的两端更换为分离缓冲液；

4)在毛细管两端施加电压作为分离驱动力；

5)通过检测光源和光阵列检测器对毛细管中的样品进行糖化血红蛋白HbAlc检测；

6)根据步骤5)所得检测数据计算得出各样品中的糖化血红蛋白HbAlc的含量。

更优选的，所述毛细管阵列中毛细管内径20-100微米，有效分离长度10-50厘米。

更优选的，所述毛细管阵列中毛细管的数量为4-48根，所述毛细管为无涂层石英毛细管或内壁有涂层的中性石英毛细管。

更优选的，所述毛细管每根的内径和长度均保持一致。

进一步的，所述4-48根毛细管构成毛细管阵列作为分离通道，可以对4-48个样品同时进样进行电泳分离和检测。

更优选的，所述各毛细管的前部互相平行，末端集合到一处。

更优选的，在步骤1)前，在构成所述阵列毛细管的毛细管内壁制备涂层。

更优选的，所述涂层为聚阳离子涂层和聚阴离子涂层所构成的双层涂层。

更优选的，制备所述双层涂层的方法为：先用聚阳离子溶液冲洗毛细管，再用聚阴离子溶液冲洗毛细管。

更优选的，在制备涂层前，使用强酸和/或强碱溶液对阵列毛细管中的毛细管进行处理。

更优选的，所述强酸和/或强碱溶液对阵列毛细管中的毛细管进行处理、聚阳离子和聚阴离子溶液冲洗毛细管、分离缓冲液充入毛细管的过程均通过压力完成，所述强酸和强碱溶液、聚阳离子和聚阴离子溶液、分离缓冲液均从毛细管阵列的末端进入，从前端排出到废液池。

更优选的，所述强酸溶液选自盐酸缓冲液或硝酸缓冲液，所述强酸溶液的浓度为0.01-1mol/L。

更优选的，所述强碱溶液选自氢氧化钠水溶液或氢氧化锂水溶液，所述强碱溶液的浓度为0.01-1mol/L。

更优选的，所述聚阳离子溶液为含有聚阳离子的水溶液，选自聚凝胺水溶液、聚二烯丙基二甲基氯化铵水溶液、白蛋白水溶液，其浓度为0.001-1wt％。

更优选的，所述聚阴离子溶液为含有聚阴离子的水溶液，选自聚丙烯酸水溶液、聚苯乙烯磺酸钠水溶液、硫酸软骨素水溶液，其浓度为0.001-1wt％。