[发明专利]润滑油（脂）中苯并(a)芘的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种食品加工过程中润滑油（脂）中有毒物的检测技术，尤其是一种润滑油（脂）中苯并(a)芘的检测方法。

背景技术

苯并(a)芘（benzo[a]pyrene，BaP）是一种最具代表性的多环芳烃化合物，被认为是世界三大强致癌物之一，是国家食品安全工作的重点监测和控制对象。一般认为，食品中的BaP主要来源于食品自身的烹调过程、加工和包装环节污染以及食品环境污染。其中，对食品熏烤、烘烤过程中BaP的产生机理，以及由煤炭、汽油、烟草等物质燃烧引起的BaP大气污染等的研究报道较多，而对加工过程中食品接触材料污染，和由于加工机械润滑油（脂）泄漏导致的食品BaP污染虽有提及却鲜有报道。

对现代生产线来说，润滑油（脂）是保持设备正常运转必不可少的物质。随着现代食品工业的发展，食品的加工日渐机械化和规模化，润滑油（脂）的使用也日益广泛，相应地，食品受到润滑油（脂）污染的机率也日趋升高。因此，国家规定在可能与食品直接接触的设备中禁止使用工业级润滑油。然而，目前采用工业级润滑油（脂）来替代食品级润滑油（脂）的现象时有发生。工业级润滑油（脂）中75%-90%为基础矿物油，这些基础油宜采用溶剂精制和活性炭吸附等工艺去除多环芳烃等非理想组分，但是由于工艺问题，这些物质并不能完全去除。一旦机械装置密封不好，润滑油（脂）发生泄漏进入食品便会导致食品的BaP污染。因此，开发润滑油（脂）中BaP的检测方法，研究工业级和食品级润滑油（脂）中BaP含量差异，提升社会对工业级润滑油（脂）使用限制必要性的认识具有重要的现实意义。

目前，针对食品中BaP的检测方法报道很多，包括高效液相色谱-质谱法，高效液相色谱-荧光检测，气相色谱–质谱法，高效液相色谱-紫外检测和高效液相色谱-串联质谱等。相对而言，润滑油（脂）中BaP的检测方法鲜有报道。因为润滑油（脂）基质复杂，不仅含有基础油还含有稠化剂和添加剂，所以直接使用上述食品中BaP的检测方法，基质干扰很大，无法实现有效检测。因此，针对润滑油(脂)特性，专门开发适用于润滑油(脂)中BaP检测的方法非常关键。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种适用性强的润滑油（脂）中苯并(a)芘的检测方法。

为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：其将润滑油或润滑脂萃取、离心、采用凝胶渗透色谱净化后，收集目标洗脱液浓缩至干；然后定容得到样品溶液；最后将样品溶液采用反相高效液相色谱-荧光法检测，外标法定量。

本发明方法采用下述检测步骤：

（1）润滑油或润滑脂用环己烷-乙酸乙酯混合溶剂浸泡、超声萃取；

（2）上述步骤得到的萃取液离心处理后，取上层清液采用凝胶渗透色谱净化，收集目标洗脱液浓缩至干，再用甲醇或乙腈定容，得到样品溶液；

（3）样品溶液采用反相高效液相色谱-荧光法检测，外标法定量。

本发明所述步骤（1）中环己烷-乙酸乙酯混合溶剂的体积比为50:50；步骤（1）中超声萃取时间为10～30 min，萃取次数为1～3次。

本发明所述步骤（2）中的萃取液采用高速冷冻离心机离心处理，转速为4000～10000 rpm，离心时间为5～10 min；步骤（2）中目标洗脱液采用旋转蒸发仪或者自动氮吹仪进行浓缩。

本发明所述润滑油或润滑脂称样量为0.5～1.5 g；所述环己烷-乙酸乙酯混合溶剂的用量为10～25 mL；所述的甲醇或乙腈体积5.0 mL；所述反相高效液相色谱-荧光法检测时样品溶液的进样量为5～20 μL。

本发明所述的凝胶渗透色谱净化的流动相为环己烷-乙酸乙酯，体积比为50:50，流速为4.7 mL/min，收集时间为16.0～21.0 min。

本发明所述反相高效液相色谱条件为等度洗脱，色谱柱为反相C18柱，流动相为甲醇-水体系或乙腈-水体系。

本发明所述C18色谱柱的规格为150 mm×4.6 mm，粒径5 μm；选用Kromasil 100-5 C18柱、SB-C18柱、XB-C18柱、Eclipse Plus C18柱或者AE.Lichrom C18-5μm-100柱；所述的流动相为体积比为（80～90）:（20～10）的甲醇-水体系，或体积比为（80～90）:（20～10）的乙腈-水体系。

本发明所述的荧光法检测条件为：激发波长为366 nm，发射波长为410 nm。

本发明所述步骤（2）中经凝胶渗透色谱净化处理后，环己烷-乙酸乙酯混合溶剂废液经旋转蒸发提纯处理后，重复使用。