[发明专利]大黄鱼头肾巨噬细胞分离和原代培养方法及其应用无效
申请号: | 201210018785.6 | 申请日: | 2012-01-20 |
公开(公告)号: | CN102533651A | 公开(公告)日: | 2012-07-04 |
发明(设计)人: | 李庆飞;艾庆辉;麦康森;徐玮;郑岳夫 | 申请(专利权)人: | 中国海洋大学 |
主分类号: | C12N5/0786 | 分类号: | C12N5/0786;C12Q1/02 |
代理公司: | 青岛海昊知识产权事务所有限公司 37201 | 代理人: | 崔清晨 |
地址: | 266100 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 大黄 鱼头 巨噬细胞 分离 培养 方法 及其 应用 | ||
1.一种大黄鱼头肾巨噬细胞分离和原代培养方法,其特征在于,首先用31%/45%梯度的Percoll分离液分离出大黄鱼头肾巨噬细胞,再用L15复合细胞培养基在20~25℃下对分离出的大黄鱼头肾原代巨噬细胞进行培养。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述的Percoll分离液中31%和45%Percoll的体积百分数范围分别为35-55%和45-65%。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述的L15复合细胞培养基,其配方如下:每升培养基中含有50ml胎牛血清、10万UI青链霉素、5万UI肝素、10mmol 4-羟乙基哌嗪乙磺酸和0.5g葡萄糖,pH为7.4。
4.权利要求1所述方法制备大黄鱼原代巨噬细胞的应用,是用于检测营养素对离体细胞免疫力的影响。
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