[发明专利]HPLC-ICP-MS联用技术检测水产品中二价镉离子的方法

说明书

技术领域：

本发明属于水产品检测技术领域，具体地涉及一种用高效液相色谱-电感耦合等离子质谱仪(HPLC-ICP-MS)联用技术测定水产品中二价镉离子的方法。

背景技术：

镉不是人体所必需的微量元素。新生婴儿体内几乎无镉，人体中镉全部是出生后通过外界环境(例如饮水、食物、香烟)进入人体的。研究显示，镉中毒会造成肾小管再吸收障碍，低分子量蛋白质和钙质等由尿中流失，长期下去容易形成骨质软化，关节疼痛、骨折及肾骼变形等。长期摄入过量的镉，会影响体内其他有益元素的效能，造成肝肾损害、肺气肿、支气管炎、内分必失调、食欲不振、失眠等问题。镉转移至动脉，使血压上升，引致血管脂肪化。另外，镉也是一种致癌物质，可能诱发前列腺癌症。

镉在正常环境中含量很低，但海藻、贝类等水生生物对镉的富集能力极强，因此镉是影响水产品食用安全的主要因素。镉在生物体内可以与蛋白质、有机酸等结合成有机镉形态存在，也可以无机态存在。环境学和毒理学研究结果证明，镉的毒性与其存在形态有关，离子态镉的毒性较高，结合态和有机态镉无毒或毒性非常微弱。若简单地仅采用镉的总含量、并以其离子态的毒性效应作为评价标准往往会高估其毒害效应，因此镉的形态差异成为影响海藻、贝类等水产品食用安全性评价的关键因素，但国内外有关水产品中镉形态的研究较少。

现行镉的检测方法是根据国标GB/T5009.15-2003中规定的食品中镉的测定方法，将水产品中各种形态镉通过高温、强氧化剂(硝酸和高氯酸)消解成离子态镉，因此该方法检测到的是水产品中镉的总量。对水产品中镉的食用安全评价尤其是对于具有高镉积累特性的海藻和贝类，不能仅以镉总量来评价，研究水产品中镉的化学形态，并建立离子态镉的分析技术已迫在眉睫。目前国际ISO和CAC标准中尚无测定水产中二价镉离子的方法标准。

发明内容：

本发明要解决的技术问题是提供一种HPLC-ICP-MS联用技术检测水产品中二价镉离子的方法，使用高效液相色谱-电感耦合等离子质谱仪联用(HPLC-ICP-MS)形态分析技术，对水产品中的镉元素进行定性和定量分析，准确测定水产品中的二价镉离子含量。

本发明是按照以下操作方法完成的：

一种HPLC-ICP-MS联用技术检测水产品中二价镉离子的方法，包括以下步骤：1)、选用的仪器及设备，HPLC-ICP-MS联用系统，2)、配置试剂与标准溶液，3)、样品处理的步骤，4)、实验所用的仪器条件，5)、样品检测与结果计算；具体步骤如下：

1)选用的仪器及设备：

(1)、液相色谱仪HPLC：使用SERIES200高压液相泵，配有自动进样器，配有保护柱CG5A4×50mm和相同材质填料的CS5A 4×250mm阳离子交换色谱柱；

(2)、电感耦合等离子体质谱仪ICP-MS：配有动态反应池，进样系统，射频发生器，等离子体系统，Chromera形态分析全自动处理接口，离子透镜系统，四极杆，真空系统，检测器，气路控制系统；

(3)、冷却循环水；

(4)、涡旋混合器；

(5)、纯水系统；

(6)、循环式真空砂芯抽滤器；

(7)、高速冷冻离心机，转速不小于8000r/min；

(8)、数控超声波清洗器；

(9)、0.22μm的水相微孔滤膜；

(10)、纯度≥99.99％的氩气；

2)配置试剂与标准溶液：

(1)、浸提液：超纯水；

(2)、流动相：50mM草酸+95mM氢氧化锂溶液，使用前经过0.22μm滤膜过滤并超声脱气；

所有的试剂均是优级纯，整个实验用水均为超纯水；玻璃仪器使用前经15％硝酸浸泡24h；

(3)、二价镉离子的标准使用液：

将100μg/mL二价镉离子标准溶液稀释至1.00μg/mL的储备液，置4℃冰箱存放备用，由1.00μg/mL的二价镉离子储备液用水稀释成10.0ng/mL、50.0ng/mL、100.0ng/mL、200.0ng/mL、500.0ng/mL的标准使用液，现用现配；

3)样品处理的步骤：

称取经粉碎过40目筛的干样0.500g～1.000g或鲜样匀浆称取2.000g～4.000g置于50mL塑料具塞刻度离心管中，加水40mL涡旋混匀后，超声浸提40min，8000r/min 4℃离心10min，取出上清液用0.22微米的水系微孔滤膜过滤后为待测样液，移入进样瓶中，上机测定待测样液中镉离子的值；

4)实验所用的仪器条件：