[发明专利]植物中的重金属减少

权利要求书

1.一种突变的、非天然发生的或转基因的植物或植物细胞，包括

（a）选自如下的多核苷酸：

（i）包括、由或基本上由与SEQ ID NO：1、2、27、28或29或51具有至少71%序列同一性的序列组成的多核苷酸；或者

（ii）包括、由或基本上由与SEQ ID NO：3-23或30-50或53中任一个具有至少65%序列同一性的序列组成的多核苷酸；或

（iii）编码NtMRP多肽的多核苷酸，NtMRP多肽包括、由或基本上由与SEQID NO：24-26或52中任一个具有至少65%序列同一性的序列组成，且其中所述多肽具有重金属转运蛋白活性；或

（b）长度上至少15个连续核苷酸的多核苷酸构建体，其与SEQ ID NO：1-23或27-51或53任一个的区域具有至少65%同一性；或

（c）双链RNA，其包括至少两条彼此至少部分互补的序列，且其中正义链包括第一序列，以及反义链包括第二序列，并且其中序列中的至少一个包括NtMRPRNA的至少10个连续核苷酸；或

（d）表达载体，其包括如（i）、（ii）或（iii）中所述的多核苷酸或如（b）中所述的多核苷酸构建体。

2.一种突变的、非天然发生的或转基因的植物，其中NtMRP多核苷酸的表达和由此编码的蛋白的活性、或由此编码的蛋白的活性减少了，并且所述植物的叶子具有比对照植物减少至少5%的镉含量，在对照植物中NtMRP的表达和由此编码的蛋白的活性、或由此编码的蛋白的活性没有减少。

3.一种包括生物质、种子或叶子的植物材料，所述生物质、种子或叶子包括来自权利要求1或权利要求2所述植物的细胞或组织。

4.一种烟草制品，其包括权利要求1或权利要求2所述植物的部分或根据权利要求3所述的植物材料。

5.一种用于在植物的至少一部分中减少镉水平的方法，其包括，和对照植物相比，减少NtMRP多核苷酸的表达和由此编码的蛋白的活性、或由此编码的蛋白的活性的步骤，在对照植物中NtMRP多核苷酸的表达和由此编码的蛋白的活性、或由此编码的蛋白的活性没有减少。

6.一种突变的、非天然发生的或转基因的植物，其是通过根据权利要求5所述的方法获得的或可获得的，其中和对照植物相比，在植物的至少部分中具有至少约5%镉含量的减少，在对照植物中NtMRP多核苷酸的表达和由此编码的蛋白的活性、或由此编码的蛋白的活性没有减少。

7.一种分离的NtMRP多肽，其由选自如下的多核苷酸表达：

（i）包括、由或基本上由与SEQ ID NO：1、2、27、28或29或51具有至少71%序列同一性的序列组成的多核苷酸；或者

（ii）包括、由或基本上由与SEQ ID NO：3-23或30-50或53中任一个具有至少65%序列同一性的序列组成的多核苷酸；或

或者一种分离的NtMRP多肽，其包括、由或基本上由SEQ ID NO：24-26或52中任一个的所示序列组成，其中所述多肽具有重金属转运蛋白活性。

8.一种抗体，其特异性结合根据权利要求7所述的分离的多肽。

9.一种检测样本中NtMRP多核苷酸的方法，包括步骤：

（a）提供含有多核苷酸的样本；

（b）所述样本接触多个引物之一或者一个或多个探针以便特异性检测NtMRP多核苷酸的至少部分；以及

（c）检测扩增产物的存在，其中扩增产物的存在指示着样本中存在NtMRP多核苷酸。

10.一种分离的多核苷酸，其选自如下：

包括、由或基本上由与SEQ ID NO：1、2、27、28或29或51具有至少71%序列同一性的序列组成的分离的多核苷酸；

包括、由或基本上由与SEQ ID NO：3-23或30-50或53中任一个具有至少65%序列同一性的序列组成的分离的多核苷酸；

编码NtMRP多肽的多核苷酸，NtMRP多肽包括、由或基本上由与SEQ ID NO：24-26或52中任一个具有至少65%序列同一性的序列组成，且其中所述多肽具有重金属转运蛋白活性。

11.一种长度至少15个连续核苷酸的多核苷酸构建体，其与SEQ ID NO：1-23或27-51或53任一个的区域具有至少65%同一性。