[发明专利]检测目标物质的方法以及用于所述方法中的适体组、传感器和装置

说明书

技术领域

本发明涉及用于检测目标物质的方法和用于所述方法中的适体组(aptamer set)、传感器和装置。

背景技术

适体是指能够结合至特定物质的核酸(DNA、RNA或PNA)和肽。关于适体，具有大结合力的序列通过使用非专利文献1中公开的称作指数富集配体系统进化(SELEX)的方法选自核酸库。

为了诸如诊断疾病、监控环境和检验所有物的各种目的，已经研究并开发了一种利用在适体与所述适体结合的物质(下文中称作目标物质)之间展示的特异结合能力的传感器。许多传感器通过检测由于适体到目标物质的结合而在所述适体和所述目标物质中造成的物理和化学变化来检测目标物质。

作为这种传感器，非专利文献2和3提出了利用适体杂交的传感器。具体地，在非专利文献2中，将适体20的互补链21(具有互补序列的核酸21；此处，核酸不是适体)固定到电极23上，如图1(a)中所示。将利用电极反应物质22改性的适体20与互补链21杂交。其后，当添加目标物质24时，适体20结合到目标物质24上(图1(b))。结果，适体20从互补链21开裂并从电极23的表面释放(图1(c))。与图1(c)的状态相比，在图1(a)的状态中，电极反应物质22改性的适体20的反应电流大。专利文献2公开了，以此方式，使用电流值的大小作为指数能够检测目标物质的存在与否。

另外，非专利文献3公开了一种适体开关探针。在该方法中，将标记有荧光分子的适体与利用淬灭剂改性的互补链杂交。

专利文献1：日本特表2009-505641号公报

非专利文献1：C.Tuerk and L.Gold,Science,vol.249(1990),p505-p510

非专利文献2：Analyst,2008,133p323-p325

非专利文献3：Journal of the American Chemical Society,vol.130(2008),p11268-11269

发明内容

然而，本发明人的研究确认，利用杂交状态的开裂的方法具有如下问题。即，在杂交状态的开裂期间，目标物质和互补链在适体上引起竞争反应，且所述竞争反应是平衡反应。因此，有时目标物质与开裂的适体分离，且互补链再次与适体杂交。结果，当目标物质的浓度低时，开裂的发生程度低，且在某些情况中不能获得足够的信号变化。因此，当目标物质的浓度低时，需要高度灵敏的检测方法。

考虑到上述状况而完成了本发明，本发明的目的是提供一种即使在目标物质的浓度低时也可以以高灵敏度检测目标物质的方法和用于所述方法的适体组、传感器和装置。

根据本发明，提供一种检测目标物质的方法，包括：

准备包含试验样品中的目标物质特异结合的第一适体和所述目标物质以外的非目标物质特异结合的第二适体的复合物，

其中所述第一适体包含一个以上形成双链的双链形成位点，所述第二适体包含两个以上双链形成位点，所述目标物质结合的所述第一适体的碱基序列包含所述第一适体的所述双链形成位点的碱基序列的至少一部分，且所述非目标物质结合的所述第二适体的碱基序列包含所述第二适体的所述两个以上双链形成位点的碱基序列的至少一部分；

将所述目标物质结合到所述第一适体上；

将所述非目标物质结合到所述第二适体上；以及

检测所述第一适体的所述双链形成位点的开裂。

根据本发明，提供一种用于检测目标物质的适体组，包含：

包含试验样品中的目标物质特异结合的第一适体和所述目标物质以外的非目标物质特异结合的第二适体的复合物，

其中所述第一适体包含一个以上形成链的形成链的位点，所述第二适体包含两个以上形成链的位点，所述目标物质结合的所述第一适体的碱基序列包含所述第一适体的所述双链形成位点的碱基序列的至少一部分，且所述非目标物质结合的所述第二适体的碱基序列包含所述第二适体的所述两个以上双链形成位点的碱基序列的至少一部分。

根据本发明，提供一种用于检测目标物质的传感器，包含：

包含试验样品中的目标物质特异结合的第一适体和所述目标物质以外的非目标物质特异结合的第二适体的复合物，