[发明专利]用于一类细胞培养和脱附的纳米凝胶支架材料及制备方法

权利要求书

1.一种用于一类细胞培养和脱附的纳米凝胶支架材料，其特征在于，由低分子量凝胶因子G1和G2自组装形成；

所述低分子量凝胶因子的结构式为：

其中：当时，所述低分子量凝胶因子为G1；当时，所述低分子量凝胶因子为G2。

2.一种制备如权利要求1所述的用于一类细胞培养和脱附的纳米凝胶支架材料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1，分别取1，4-环己烷二甲酸、L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐、组胺、BOC-L-赖氨酸、N，N′-羰基二咪唑、无水1-羟基-苯并-三氮唑、二氯亚砜、三氟乙酸、三乙胺；

步骤2，将1，4-环己烷二甲酸溶于二氯亚砜中搅拌反应；

步骤3，将步骤2所得反应液旋转蒸发后，真空干燥得1，4-环己烷二酰氯；

步骤4，将L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐的无水二氯甲烷溶液冷却，加入三乙胺，再加入1，4-环己烷二酰氯的无水二氯甲烷溶液，得反应溶液，将反应溶液缓慢升至室温并搅拌；

步骤5，旋转蒸发反应液，加入去离子水，过滤收集沉淀，所得沉淀用乙醇重结晶，过滤并于烘箱中干燥，得产物1，4-环己烷苯丙氨酸甲酯；

步骤6，向1，4-环己烷苯丙氨酸甲酯的甲醇溶液中加入2M氢氧化钠溶液，反应混合物在室温下搅拌反应，用3M盐酸溶液将反应液pH值调至小于3，过滤收集所生成沉淀并真空干燥，得到中间体1，4-环己烷苯丙氨酸；

步骤7，将中间体1，4-环己烷苯丙氨酸、酰化催化剂N，N′-羰基二咪唑、无水1-羟基-苯并-三氮唑溶于二甲基亚砜中，并加入三乙胺，在室温下搅拌活化，活化后将组胺加入上述反应液中进行酰胺化反应；

步骤8，将步骤7所得反应液倒入去离子水中，得到凝胶状白色沉淀，过滤收集所生成沉淀并真空干燥，得到低分子量凝胶因子G1；

步骤9，将中间体1，4-环己烷苯丙氨酸、酰化催化剂N，N′-羰基二咪唑、无水1-羟基-苯并-三氮唑溶于二甲基亚砜中，并加入三乙胺，在室温下搅拌活化，活化后将BOC-L-赖氨酸加入上述反应液中进行酰胺化反应；

步骤10，将步骤9所得反应液倒入去离子水中，得到白色沉淀，过滤收集所生成沉淀并真空干燥，得到产物BOC-G2；

步骤11，将BOC-G2溶于无水二氯甲烷中进行搅拌，并加入三氟乙酸在室温下进行水解；

步骤12，将步骤11所得反应液旋转蒸发，并用二氯甲烷和甲苯分别对产物进行冲洗；将二氯甲烷和甲苯旋转蒸发后，收集所生成产物并真空干燥，得到低分子量凝胶因子G2；

步骤13，将前述步骤得到的低分子量凝胶因子G1和G2通过调节溶剂温度或调节溶剂pH值，自组装形成用于一类细胞培养和脱附的纳米凝胶支架材料。

3.根据权利要求2所述的用于一类细胞培养和脱附的纳米凝胶支架材料的制备方法，其特征在于，所述步骤2中，1，4-环己烷二甲酸及二氯亚砜中的摩尔比为1∶4.4，反应温度为95～100℃，反应时间为3～4小时。

4.根据权利要求2所述的用于一类细胞培养和脱附的纳米凝胶支架材料的制备方法，其特征在于，所述步骤4中，1，4-环己烷二酰氯、L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐和三乙胺的摩尔比为1∶2∶6，所述冷却为冷却到0℃，所述搅拌的时间为12～16小时。

5.根据权利要求2所述的用于一类细胞培养和脱附的纳米凝胶支架材料的制备方法，其特征在于，所述步骤6中，搅拌反应时间为20～24小时。

6.根据权利要求2所述的用于一类细胞培养和脱附的纳米凝胶支架材料的制备方法，其特征在于，所述步骤7中，1，4-环己烷苯丙氨酸、N，N′-羰基二咪唑、无水1-羟基-苯并-三氮唑、三乙胺及组胺的摩尔比为1∶2∶2∶2.3∶2，活化时间为1.5～2小时，酰胺化时间为16～20小时。

7.根据权利要求2所述的用于一类细胞培养和脱附的纳米凝胶支架材料的制备方法，其特征在于，所述步骤9中，1，4-环己烷苯丙氨酸、N，N′-羰基二咪唑、无水1-羟基-苯并-三氮唑、三乙胺及BOC-L-赖氨酸的摩尔比为1∶2∶2∶2.3∶2，活化时间为1.5～2小时，酰胺化时间为16～20小时。

8.根据权利要求2所述的用于一类细胞培养和脱附的纳米凝胶支架材料的制备方法，其特征在于，所述步骤11中，搅拌反应时间为3～4小时。