[发明专利]新生大鼠嗅球嗅鞘细胞的分离方法无效
申请号: | 201110447659.8 | 申请日: | 2011-12-27 |
公开(公告)号: | CN102559594A | 公开(公告)日: | 2012-07-11 |
发明(设计)人: | 吴卫江 | 申请(专利权)人: | 吴卫江 |
主分类号: | C12N5/079 | 分类号: | C12N5/079 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 214000 江苏省无*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 新生 大鼠 嗅球嗅鞘 细胞 分离 方法 | ||
1.一种新生大鼠嗅球嗅鞘细胞的分离方法,其应用于嗅球嗅鞘细胞的纯化过程,所述纯化过程的步骤包括OECs的取材;OECs的分离:OECs分组纯化;形态学观察以及OECs纯度检测;其中所述OECs的分离方法包括:
将位于嗅球最外层的嗅神经层的嗅小球层以及少量连接的嗅神经轻轻剥下,用PBS液冲洗2遍,剪碎组织块,用浓度为0.125%的胰蛋白酶消化液在37℃下消化15min,经胰酶消化的组织小块移入生长培养液(20%小牛血清的DMEM/F212)中,静置10min,以中和胰酶作用;
离心(800r/min,3min)去除上清液,吸取管底的组织小块,生长培养液清洗2次;
将组织小块移入2ml的生长培养液中,再用火焰抛光后的Pasteur移液管反复吹打组织块15~20次,使之形成细胞悬液;以及
取一滴细胞悬液滴于细胞计数板计数,用生长培养液调整细胞浓度为5×105/ml。
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