[发明专利]唇香草指纹图谱的建立方法及指纹图谱

说明书

技术领域

本发明涉及一种唇香草指纹图谱的建立方法及指纹图谱，属于药物分析技术领域。

背景技术

     目前，指纹图谱已成为国际公认的控制中药或天然药物质量的有效手段，指纹图谱技术已成为当前中药界关注的热点问题。国际上采用指纹图谱质控技术对植物药进行质量控制的国家有韩国、日本、德国等，如德国用指纹图谱技术控制银杏制剂的质量；美国FDA对植物药的质量控制则要求必须控制指纹图谱的检测标准。用指纹图谱制定注射剂质量标准也被纳入药典，但在我国现有标准中，中药材、中成药的质量标准大量仅限于外观鉴别、性状检查，很少对其中有效成分进行检查。即使在建立成分测定的标准中，所测成分大部分仅为一个或几个指标成分，而不是直接与疗效相关的有效成分。在常规检查中，外观、性状的鉴别以及化学鉴别项中，存在大量普适性内容，有效成分的专属性不强，很难对药材或制剂的特性有一个全面的描述。中药指纹图谱可从整体上分析中药的生物、理化特征,又具有一定的可量化参数,充分体现了中药整体性和模糊性的特点。因此,经过严格试验获得重现性良好的指纹图谱用于中药质量控制,对中医现代化和国际化具有重大意义。一般常用于植物药材指纹图谱的鉴定方法有显微鉴定、性状鉴定、理化鉴定。

唇香草(Ziziphora clinopodioides Lam.)为唇形科新塔花属植物唇香草的干燥地上部分，维吾尔名称为苏则。本品为多年生半灌木状草本,喜生于低山坡、草地及干旱坡地上,分布于新疆、前苏联、蒙古及中亚地区亦有分布。性味辛凉、微苦,具有强心利湿、理气化痰、消炎散结的功效,维吾尔医将唇香草长期用于临床治疗冠心病、心绞痛、气管炎、肺脓肿的复方中。现代动物实验结果证实，唇香草对急性缺血的心肌和氧化损伤的心肌细胞均有明显的保护作用。文献报道唇香草的有效成分有挥发油类，有机酸类，黄酮类等多种成分，并仅对其进行定性、定量分析缺乏全面反映唇香草质量的标准控制手段。单靠测定某种有效成分考查质量的稳定性是不够的，难以达到对唇香草质量的有效控制。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术的缺陷，提供了一种唇香草指纹图谱的建立方法，以及由此方法所得到的唇香草的指纹图谱，以此达到完善其质量评价体系，有效控制唇香草药材质量的目的。

为了解决上述技术问题，本发明提供了如下的技术方案：

唇香草指纹图谱的建立方法，包括以下步骤;

(1)标准品溶液的制备：

分别称取标准品地奥司明、蒙花苷和胡薄荷酮，用含二甲基亚砜为20%-30%v/v的甲醇溶液溶解并定容，使地奥司明、蒙花苷和胡薄荷酮的浓度分别为0.0122-0.1708mg/ml、0.0276-0.3804mg/ml、0.0063-0.0879mg/ml的溶液，作为标准品溶液；

（2）供试品溶液的制备：

称取唇香草粉末，每1g加入含二甲基亚砜为20%-30%v/v的甲醇溶液8-15ml，浸泡0.5-1.5h，超声提取0.5-1h，过滤，用含二甲基亚砜为20%-30%v/v的甲醇溶液定容，用微孔滤膜过滤，即得供试品溶液；

（3）高分离度快速液相色谱（RRLC）法分析：

色谱条件：XDB-C18色谱柱，50mm×4.6mm ，1.8??m，流速0.9 ml/min，检测波长270nm，柱温30℃，进样量6ml，流动相A为1%v/v乙酸水溶液，流动相B为甲醇，采用梯度洗脱：0–4 min，乙酸水溶液由77%降低到58%；4–10 min，乙酸水溶液由58%降低到50%；

分别吸取上述标准品溶液和供试品溶液，注入高分离度快速液相色谱仪中进行高分离度快速液相色谱检测，按照上述条件操作，得到唇香草的RRLC指纹图谱。

该指纹图谱中的共有特征峰为地奥司明（12）、蒙花苷（15）、胡薄荷酮（16）三个峰，其保留时间分别为29.617min、40.522min和46.897min。