[发明专利]一种凡纳滨对虾的免疫增强剂

说明书

技术领域

本发明属于水产饲料免疫增强剂技术领域，具体涉及一种凡纳滨对虾的免疫增强剂，即可以提高凡纳滨对虾免疫力和抗病力的羧甲基酵母多糖。

背景技术

养殖对虾疾病是一个世界性难题，其原因在于种质的退化和由于片面追求产量造成的养殖环境恶化。1996年至2010年间，世界范围内由于对虾疾病造成的损失达到27.5亿美元。免疫增强剂是指具有促进或诱发宿主防御反应，增强生物机体抗病能力的一类物质，主要作用于水生无脊椎动物的非特异性免疫系统，激活机体自身的免疫机能从而达到防御效果，增强其抗病力。与抗生素和疫苗相比，免疫增强剂具有安全、无残留、作用范围广和使用方便等优点。但是免疫增强剂在凡纳滨对虾养殖生产中效果不佳，主要表现在当疾病爆发时，使用免疫增强剂往往没有预期效果。酵母多糖是水产养殖中常用的免疫增强剂，但也存在对养殖对虾免疫力和抗病力提高不显著等缺点。因此，急需一种对凡纳滨对虾具有显著免疫效果的免疫增强剂。

发明内容

本发明的目的是提供一种提高凡纳滨对虾免疫力和抗病力的羧甲基酵母多糖，从而弥补现有技术的不足。

本发明的凡纳滨对虾的免疫增强剂，为羧甲基酵母多糖，其羧甲基取代度为0.348～0.356。

本发明免疫增强剂的制备方法，是在碱性的反应体系下，添加氯乙酸钠与酵母多糖反应制备羧甲基酵母多糖。

上述制备方法中添加的氯乙酸钠与酵母多糖的质量比为11∶25。

本发明的免疫增强剂，添加在凡纳滨对虾饲料中，与饲料的质量比为1∶500～1000。

上述的饲料配方优选为：鱼粉20～24％，虾壳粉4～8％，面粉34～39％，鱿鱼内脏粉4～8％，豆粕10～14％，花生粕8～12％，鱼油2.0～2.4％，大豆软磷脂0.8～1.4％，对虾用维生素矿物质预混料4～4.5％。

本发明的免疫增强剂在对虾饲料中使用，添加量仅为0.1％-0.2％，就能明显促进凡纳滨对虾的生长，显著提高凡纳滨对虾的免疫力和抗病力。其应用效果显著好于酵母多糖。同时，本发明的免疫增强剂配合申请人制备的凡纳滨对虾饵料来使用时，能够获得更好的效果。

说明书附图

图1：本发明的羧甲基酵母多糖的结构式。

具体实施方式

下面对本发明的免疫增强剂羧甲基酵母多糖进行详细描述

实施例1：不同取代度的羧甲基酵母多糖的制作

取6.2ml 30％的氢氧化钠溶液和62.5ml异丙醇，在10℃下将二者混匀，制成反应体系。向反应体系中慢慢加入5g酵母多糖，在10℃下反应1小时，反应期间不断搅拌，使反应得以充分进行。另取2.2克氯乙酸钠溶解于7ml去离子水中，将此7ml氯乙酸钠水溶液迅速加入上述反应体系中。将反应体系置于70℃下反应2小时，在此期间，不断搅拌，使反应得以充分进行。2小时后，用6mol/L盐酸溶液将反应体系pH调至7.0；最后将反应体系用去离子水透析72小时，得到不含有氯离子的羧甲基酵母多糖的溶液。将此溶液真空干燥，得到羧甲基酵母多糖A。

为制作不同取代度的羧甲基酵母多糖，在反应中，增加氯乙酸钠的量，同时保持制备步骤和其它参数不变。氯乙酸的添加量，分别选取3.95g、7.15g和10.11g，制得羧甲基酵母多糖B、羧甲基酵母多糖C、羧甲基酵母多糖D。

实施例2：羧甲基酵母多糖取代度的测定

将1g羧甲基酵母多糖溶解于15ml丙酮中，充分混匀。向上述体系加入3ml6mol/L盐酸溶液，反应30分钟，在此期间内，不断搅拌，使之充分反应。将反应液过滤，以80％的甲醇洗涤滤渣，使滤渣呈中性。将滤渣在50℃下烘烤2小时，使其充分干燥。取0.5g滤渣，溶于20ml 0.2mol/L氢氧化钠溶液，并用蒸馏水定容到100ml。取25ml定容液，加入1滴酚酞试剂，以0.05M盐酸滴定至无色，记下所用体积V1。另取20ml 0.2mol/L氢氧化钠溶液，并用蒸馏水定容到100ml。取25ml定容液，加入1滴酚酞试剂，以0.05mol/L盐酸溶液滴定至无色，记下所用体积V2。取代度的计算如下：

取代度＝162×(V2-V1)×0.05×4/(0.5-58×(V2-V1)×0.05×4)

经过测量和计算，羧甲基酵母多糖A的取代度为0.348-0.356。羧甲基酵母多糖B的取代度为0.446-0.453。羧甲基酵母多糖C的取代度为0.768-0.775。羧甲基酵母多糖D的取代度为0.941-0.947。

实施例3：酵母多糖和羧甲基酵母多糖溶解率的测定