[发明专利]一种从菘蓝中提取青黛酮的方法

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及一种从菘蓝中提取青黛酮的方法。

背景技术

菘蓝，拉丁植物名：Isatis indigotica Fortune，别名：茶蓝、板蓝根、大青叶。性味：味苦，性寒。归经：归肝；胃经。功能：清热解毒，凉血消斑。主治：用于温病发热，发斑，风热感冒，咽喉肿痛。丹毒，流行性乙型脑炎、肝炎和腮腺炎等症。主要分布于内蒙古、陕西、甘肃、河北、山东、江苏、浙江、安徽、贵州等地。

青黛酮，暗紫色细针晶，吲哚类生物碱，化学号：97457-31-3，分子式：C₂₃H₁₃N₃O₂，分子量：363.38。来源于菘蓝的茎叶，具有抗肿瘤活性。对小鼠Lewis肺癌及黑色素瘤细胞株B16均有抑制作用。

目前，对青黛酮的研究较少，经检索，尚未发现适宜于大量制备青黛酮的工业化方法的公开报道。

发明内容

针对上述情况，本发明的目的是提供一种从菘蓝中提取青黛酮的方法，可有效解决从菘蓝中提取青黛酮的问题。

本发明的技术构思是这样的：将菘蓝叶粉碎，经60-95%乙醇或甲醇溶液浸泡1-2h，加热至80-95℃索氏提取提取2-10h，提取液减压回收至无醇味，加水分散，上柱分离，洗脱液浓缩，用乙醚萃取至萃余液中无生物碱反应，萃取液浓缩干燥得青黛酮粗品，用制备型高效液相色谱精制得到青黛酮对照品，纯度达98%以上。

所述上柱分离可采用大孔树脂柱分离或者离子树脂柱分离。

所述大孔树脂型号可选AB-8、D101、HP20、HZ841、LDA-10等，洗脱溶剂为乙醇溶液，先用10-20%乙醇溶液洗脱，再用60-80%乙醇溶液洗脱，收集60-80%的乙醇洗脱液。

所述离子树脂为羧甲基型弱酸性阳离子树脂，用体积百分比为1-5%的氨水洗脱，洗脱液即为生物碱活性成分。

所述制备型高效液相色谱色谱条件为：流动相为乙腈-水，流速20-50ml/min。

本发明的有益效果是：采用索氏提取，可实现连续提取，同时浓缩提取液，既节约溶剂，又提高了萃取率；通过大孔树脂或离子树脂分离，初步提高了产品的纯度；采用制备型高效液相色谱精制纯化，纯度高达98%以上，所得产品可作为对照品使用，同时可进行大量制备；本发明工艺稳定，可用于工业化生产。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明进行进一步说明。

实施例1：

将菘蓝茎叶粉碎，称取1000g，加入相当于原料量3倍的95%甲醇溶液浸泡2h，然后加热至84℃索氏提取6h，收集提取液取液减压回收甲醇至无醇味，加水溶解分散，离心，上清液上HZ841大孔吸附树脂柱，先用20%乙醇溶液冲柱至洗脱液流出无色，再用60%乙醇溶液洗脱，收集60%乙醇洗脱液，减压浓缩，用乙醚反复萃取6次，萃取液浓缩干燥得青黛酮粗品。将青黛酮粗品用甲醇溶解，微孔滤膜滤过，经制备高效液相色谱分离，色谱柱：C18，流动相：乙腈-水（68:32），流速25ml/min，以紫外检测器检测指导产品收集，连续进样，收集含有青黛酮的高纯度流分，浓缩干燥得产品32mg，含量为98.1%。

实施例2：

将菘蓝茎叶粉碎，称取1000g，加入相当于原料量5倍的75%乙醇溶液浸泡2h，然后加热至93℃索氏提取8h，收集提取液取液减压回收乙醇至无醇味，加水溶解分散，离心，上清液上羧甲基型弱酸性阳离子树脂柱，先用水冲柱至洗脱液流出无色，再用体积百分比为5%的氨水洗脱，收集氨水洗脱液，减压浓缩，用乙醚反复萃取5次，萃取液浓缩干燥得青黛酮粗品。将青黛酮粗品用甲醇溶解，微孔滤膜滤过，经制备高效液相色谱分离，色谱柱：C18，流动相：乙腈-水（60:40），流速20ml/min，以紫外检测器检测指导产品收集，连续进样，收集含有青黛酮的高纯度流分，浓缩干燥得产品28mg，含量为98.5%。

实施例3：