[发明专利]试样的分离、识别、分注方法和其装置及解析装置有效
申请号: | 201110303525.9 | 申请日: | 2005-04-25 |
公开(公告)号: | CN102519919A | 公开(公告)日: | 2012-06-27 |
发明(设计)人: | 高桥亨;月井健;徐杰 | 申请(专利权)人: | 古河电气工业株式会社 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N21/53;G01N21/59;G01N35/02;G01N35/10 |
代理公司: | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人: | 雒运朴 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 试样 分离 识别 方法 装置 解析 | ||
本案是申请号(200580020607.5)、发明名称(试样的分离、识别、分注方法和其装置及解析装置)的分案。
技术领域
本发明涉及试样(凝集试样)的分离方法、识别方法、分注方法及用于实施各方法的装置及解析装置。
背景技术
用于试样(specimen)的分离·识别·分注的现有的细胞分类器(cell sorter),大致由分离部、检测部、分注部构成。
首先,参照图41对分离部进行说明。首先,为了使试验管241中的凝集试样243均匀化,而使试验管241振动,或搅拌试验管241内。接着,用吸移管245对试验管241内的凝集试样243反复进行吸入·排出251。凝集试样247由于反复进行该吸入·排出251而受剪切应力,因此分离为单一试样249。该方法中,位于凝集试样247的表面侧的单一试样由于容易受剪切应力,因此容易分离为单一试样249。但是,位于凝集试样247的中心的单一试样始终受较高的压迫力,直至凝集试样247的分离结束。
其次,根据图42对检测部进行说明。在检测部201中,若例如使用加压空气215对收容有被分离后的试样211的容器进行加压,则试样211从喷嘴的排出·吸入口214流入并在喷嘴中上升。从喷嘴的排出·吸入口214流入的试样211,被监控光203照射,并通过照射产生荧光·散射光205。通过检测该荧光·散射光,对试样进行逐一的判定。此时,含有试样211的试料流207被鞘(sheath)流209包裹,并控制试料流207及鞘流209的流速,将试料流207的宽度控制为试样211一个个地流动的状态。这样是为了使监控光203对试样一个个地进行照射。
其次,根据图43对分注部进行说明。用分注部221对试样进行分注。首先,在排出部223施加超声波振动而形成液滴。其次,对通过超声波振动而形成的液滴225例如赋予数百伏的电荷。接着,从偏向板227施加数千伏的电压,将各自的液滴的落下方向分开到正极侧229和负极侧231并分注到容器233、235中。
非专利文献1:山下达郎、丹羽真一郎,细胞工程Vol.16.No.10p1532-1541,1997
现有的细胞分类器如上所述分为分离部、检测部、分注部,但存在如下所示的问题。
首先,在现有的分离部中,试验管的振动、试验管内的搅拌、吸移管的吸入·排出都是手动作业,从而存在没有定量性、缺乏再现性、并且分离效率差的问题。还有由于不能确认分离状态,因此,不能确认是否可靠地分离为单一试样。
其次,在现有的检测部中,使监控光203从流路外部向试样211照射,且在流路外部进行产生的荧光·散射光205的受光,因此,存在监控光203的照射效率低及荧光·散射光205的受光灵敏度低的问题。还有存在从试料吸入部到测定点的距离213较长,若不使大量的试料例如数ml左右流动则不能测定的问题。
其次,在现有的分注部中,分注时对试样施加高频振动或数千伏的高电荷。因此,例如在使用了活细胞作为试样例时,存在分注后的试样的死亡率高,并且即使活着的试样也不能可靠地保证处于正常状态的问题。
发明内容
为了解决所述问题,本发明的第一方式是一种试样分离装置,其特征在于,具备:收容有试样的容器;用于从所述容器吸入、排出试样的喷嘴;用于使所述喷嘴上下左右运动的喷嘴动作机构;用于控制所述喷嘴的吸入力、排出力的喷嘴控制机构。
本发明的第二方式,在所述第一方式的基础上,其特征在于,具备用于识别在所述喷嘴内流动的试样的识别要素的有无或对光的反应的监控光照射部及受光部。
本发明的第三方式是一种试样的分离方法,其特征在于,包括吸入工序、排出工序、分离工序,所述吸入工序基于数据来调整吸入力同时用喷嘴从收容有试样的容器吸入试样,所述排出工序基于数据来调整排出力并从喷嘴将吸入后的试样排出到容器中,所述分离工序使试样与容器的内壁面冲撞而对其进行分离,通过反复进行各工序使试样产生剪切应力及通过使试样与容器内壁面冲撞而引起的拉伸应力,从而对试样进行分离。
本发明的第四方式,在第三方式的基础上,其特征在于,向所述试样照射监控光,计测由所述试样引起的该监控光的变化,同时进行试样的分离。
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