[发明专利]一种从臭灵丹草中提取洋艾素的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然药物化学领域，特别是涉及一种从臭灵丹草中提取洋艾素的方法。

背景技术

洋艾素为黄酮类物质，分子式：C₂₀H₂₀O₈，分子量：384，结构式：

臭灵丹草为菊科植物翼齿六凌菊全草，又叫鹿耳林、大黑药，传统医学认为其具有清热解毒、止咳祛痰作用。现有成药灵丹草颗粒、片剂和合剂，用于风热邪毒，咽喉肿痛，肺热咳嗽；急性咽炎、扁桃体炎、上呼吸道感染等症。现代研究发现，臭灵丹草中不仅含有萜类功能性成分，含有黄酮类功能性成分，其中洋艾素就是臭灵丹草中的功能性指标性成分，《药典》2010版规定臭灵丹草中洋艾素含量不得低于0.1%。

通过文献检索，从臭灵丹草中提取洋艾素的方法公开甚少，尤其是工业化方法。如文献“臭灵丹菇类和黄酮化合物”采用的方法是水煎煮提取，硅胶柱色谱和重结晶等方法进行分离纯化得到包括洋艾素在内的多种化合物。由于臭灵丹草中成分复杂，采用传统的水回流提取或低碳醇回流提取，提取成分较多，分离纯化较为困难。

超临界CO2流体萃取原理是利用超临界流体的溶解能力与其密度的关系，即利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响而进行的。在超临界状态下，将超临界流体与待分离的物质接触，使其有选择性地把极性大小、沸点高低和分子量大小的成分依次萃取出来。由于超临界CO2流体萃取具有高效、无污染的特点，在天然产物生产中得到广泛应用。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的缺陷和不足，提供一种从臭灵丹草中提取洋艾素的方法。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：一种从臭灵丹草中提取洋艾素的方法，其特征在于以下步骤:

a取臭灵丹草粉碎40-80目，加入超临界萃取釜中，在萃取压力15-30MPa、温度40-50℃的条件下，超临界CO2梯度萃取，解析，得粗提物；

b上述粗提物加入聚酰胺树脂干燥，装柱，乙醇溶液梯度洗脱，薄层检测，收集目高浓度流分，浓缩结晶，再采用乙醇溶液溶解重结晶，干燥即得洋艾素。

步骤a中所述的临界CO2梯度萃取为：先通入液态CO2萃取1-3小时，所得萃取物弃去，再通入液态CO2和夹带剂萃取1-3小时，得有效萃取物，夹带剂可选甲醇、乙醇或丙酮溶液。

步骤a中所述的解析条件：解析压力5-10MPa，温度50-60℃。

步骤b中所述的乙醇溶液梯度洗脱为：先取4-8BV20-50%的乙醇洗脱杂质，再用55-90%乙醇溶液洗脱。

本发明的优势是：采用了超临界CO2梯度萃取，先萃取小分子非极性物质，再通入加夹带剂萃取有效成分，所得粗提物含量高，萃取过程中能耗低、无污染、效率高，而且整个工艺操作简单，易于实现工业化生产。

具体实施方式

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明。

实施例1：

臭灵丹草药材粉碎80目，取1kg加入超临界萃取釜中，通入液态CO2，设置在萃取压力18MPa、温度50℃，达到上述参数后，调整液态CO2流速为20kg/h，动态萃取2小时，在压力5MPa，温度50℃调件下解析萃取物弃去，再调节压力25MPa，同时通入无水丙酮做夹带剂，流速0.3L/h，萃取2小时，解析萃取物，加入100g聚酰胺树脂混匀干燥，装柱，先取400ml50%乙醇洗脱杂质，再用60%乙醇溶液洗脱，薄层检测，收集高浓度流分，浓缩至约1/3体积结晶，滤出再用80%乙醇回流溶解重结晶，干燥，得洋艾素720mg，经HPLC检测，含量93.4%。

实施例2：

臭灵丹草药材粉碎80目，取3kg加入超临界萃取釜中，通入液态CO2，设置在萃取压力20MPa、温度60℃，达到上述参数后，调整液态CO2流速为25kg/h，动态萃取2小时，在压力6MPa，温度60℃调件下解析萃取物弃去，再调节压力30MPa，同时通入70%乙醇做夹带剂，流速1L/h，萃取3小时，解析萃取物，加入200g聚酰胺树脂混匀干燥，装柱，先取1L40%乙醇洗脱杂质，再用70%乙醇溶液洗脱，薄层检测，收集高浓度流分，浓缩至约1/4体积结晶，滤出再用70%乙醇回流溶解重结晶，干燥，得洋艾素2.5g，经HPLC检测，含量89.7%。

实施例3：

臭灵丹草药材粉碎80目，取5kg加入超临界萃取釜中，通入液态CO2，设置在萃取压力22MPa、温度55℃，达到上述参数后，调整液态CO2流速为25kg/h，动态萃取2小时，在压力8MPa，温度60℃调件下解析萃取物弃去，再调节压力25MPa，同时通入60%甲醇做夹带剂，流速4L/h，萃取2小时，解析萃取物，加入500g聚酰胺树脂混匀干燥，装柱，先取3L45%乙醇洗脱杂质，再用65%乙醇溶液洗脱，薄层检测，收集高浓度流分，浓缩至约1/3体积结晶，滤出再用90%乙醇回流溶解重结晶，干燥，得洋艾素4.8g，经HPLC检测，含量90.3%。