[发明专利]马钱子总碱的提取分离方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药有效成分的提取方法，特别是涉及一种从中药马钱子中提取马钱子总生物碱的方法，属于药物技术领域。

背景技术

马钱子又名番木鳖，始载于《本早纲目》，味苦，寒性，有大毒，归肝，脾经，功效为通络止痛，散结消肿。临床上用与风湿顽痹，麻木瘫痪，跌打损伤，痈疽肿痛，小儿麻痹后遗症，类风湿性关节炎等疾病；但具有剧毒的特性严重影响其在临床上的应用，所谓“毒药猛剂善起沉疴”。马钱子的治疗量为0.3-0.6g，过量易出现中毒，如何合理安全使用马钱子，成为近年的研究热点之一。

研究表明，总生物碱是马钱子中最主要的有效部位，包括马钱子碱、士的宁、番木鳖次碱、马钱子新碱、番木鳖甙、依卡精等，其中马钱子中的主要生物碱成分中马钱子碱具有抗炎、镇痛作用，而其中士的宁是中枢神经兴奋剂，主要在临床上治疗面瘫，神经麻痹等，同时其为主要的毒性成分，基本无抗炎、镇痛作用；文献报道小鼠灌服士的宁、马钱子碱、马钱子仁的LD50分别为3.27mg/kg、233mg/kg和234.5mg/kg；小鼠腹腔注射上述药物的LD50分别为1.53mg/kg、69.77mg/kg和76mg/kg，其口服中毒剂量成人为5～10mg，口服致死量为30mg。表明士的宁是马钱子中的主要毒性成分。有文献报道，分别用士的宁和马钱子碱给小鼠灌胃，两者的LD50分别为3.27mg/kg和233mg/kg，由此可以得知士的宁的安全性很低，如果能除去马钱子总生物碱中的部分士的宁，则既能降低其毒性，又能保留其原有的抗炎镇痛的药理活性，提高临床用药的安全性。因此，现代研究中需要一种能降低士的宁含量的马钱子总碱的提取方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种安全、成本低、收率高、能有效降低士的宁含量的马钱子总生物碱的提取方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：

(1)取马钱子，粉碎成粗粉，备用；

(2)将马钱子粗粉加酸液提取，合并提取液，过滤，得马钱子提取液；

(3)提取液减压浓缩，加甲醇醇沉，回收甲醇，继续浓缩至干膏；

(4)干膏加碱液溶解，过滤；

(5)滤液加乙酸乙酯萃取，合并萃取液，回收乙酸乙酯，脱水蒸干，得马钱子总碱。

优选的技术方案为：

(1)取马钱子，粉碎成粗粉，备用；

(2)将马钱子粗粉加酸液提取，合并提取液，过滤，得马钱子提取液，滤过，合并滤液；

(3)滤液减压浓缩，并继续浓缩至稠膏；稠膏加甲醇醇沉，回收甲醇，继续浓缩至干膏；

(4)干膏加碱液溶解，过滤，滤液加乙酸乙酯萃取，合并萃取液；

(5)回收乙酸乙酯，脱水蒸干，得马钱子总碱。

基于上述工艺过程，发明人又进行了进一步的研究，细化各步骤的参数，从而筛选出最优方案，具体内容如下：

步骤(1)中马钱子是指制马钱子；

步骤(2)中的酸液是指1％-5％的盐酸、0.5％-2％的硫酸、盐酸乙醇溶液、硫酸乙醇溶液中的一种；

其中酸醇溶液优选50-80％ETOH·0.5-5％HCl，50-80％ETOH·0.5-2％H₂SO₄。

提取方法为渗漉法，回流法、搅拌法中的一种，优选加热回流法。

酸液用量为5-12倍量，加热回流次数为1-3次，每次0.5-2小时；

优选酸液用量为10倍量，加热回流次数为2次，每次1.5小时；

步骤(2)中滤液调pH值6-7；

步骤(3)中滤液减压浓缩后调节pH值至10-11；

步骤(3)中滤液减压浓缩至0.5g药材/ml-1g药材/ml；调节pH值至10-11；

步骤(3)中稠膏加甲醇采取搅拌提取，搅拌提取时间为1-5小时，优选3小时。甲醇用量为5-12倍量；优选8-10倍量。

步骤(4)中碱液是指氢氧化钠溶液、碳酸钠溶液、碳酸氢钠溶液，氨水溶液；优选氨水溶液。氨水的用量为3-8倍量。

乙酸乙酯的用量为0.5-3倍量；优选1倍量。

萃取次数为2-6次；优选4次。

通过以上方法制得的马钱子总碱含量≥50％，其中马钱子碱的含量≥50％，士的宁的含量＜10％。