[发明专利]山羊接触传染性胸膜肺炎抗体检测试纸条及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于动物检验检测技术领域，涉及对山羊接触传染性胸膜肺炎抗体快速准确诊断领域，具体说是一种山羊接触传染性胸膜肺炎抗体检测试纸条，本发明还包含有该试纸条的制备方法。

背景技术

    山羊接触传染性胸膜肺炎（contagious caprine plueropneumonia CCPP）是由山羊支原体山羊肺炎亚种（Mycoplasma capricolum subsp. capripneumoniae Mccp）引起的一种高度接触性传染性疾病。国际兽医局（OIE）将其列为羊的B类传染病。截止目前，世界上有苏丹、印度、巴基斯坦、土耳其、叙利亚、肯尼亚、埃塞俄比亚等40多个国家报道该病的发生（OIE，2008）。我国于1935年在内蒙古百灵庙地区曾流行过山羊的“烂肺病”。后来又在山西、河北、山东、湖北、云南、江西、新疆以及内蒙等地均有本病的发生（邱明亮，1950；房晓文，1958；吴光先，1963；李天华，1985）。近年来，随着我国山羊养殖业的发展，在贵州、福建、山东、内蒙古等地陆续报道有疑似CCPP的发生（潘淑惠,2002；2007，辛九庆；余松青,2009； 德淑凤，2010）。据资料记载此病感染山羊发病率为19%～90%，死亡率约为40%～100%。目前，CCPP是影响中亚、北非、中东等国家和地区山羊养殖业的重要疾病之一，所以该病的早期诊断和早期预防治疗尤为重要。

Mccp由于在体外培养时对营养要求苛刻，生长缓慢，所以Mccp的分离鉴定比较困难。PCR等病原检测方法，需要特殊的设备和技术，所以在基层不易使用。建立一种敏感、特异的快速血清学诊断方法亟待解决的问题。目前，国际上主要有4种Mccp的血清抗体检测方法，分别为补体结合试验(Complement fixation test CFT)、间接血凝试验（Indirect haemagglutination test  IHAT）、乳胶凝集试验（Latex agglutination test  LAT）和竞争酶链免疫吸附试验。上述诊断方法在防制Mccp起到了一定的有效作用，但其仍存在不足之处：                                                补体结合试验：用补体结合试验测定Mccp感染，此试验是国际贸易指定试验。这项试验虽然特异性较高，但敏感性较差，其主要的缺点是需要有高水平的技术经验者操作（Sharew , Staak , &Thiaucourt ,2005）；间接血凝试验： IHA试验已用于由Mccp引起的CCPP的临床诊断和群体发病情况调查（Cho, Ruhnke &Langford，1976）。 本试验最常用新鲜的或戊二醛处理的红细胞，前者较敏感，重复性较差，而且每次试验都要用抗原致敏红细胞；后者比较实用但敏感性低。乳胶凝集试验：LA试验用Mccp产生并存在于培养物上清液中的CPS致敏乳胶颗粒，已用于玻片凝集试验（Rurangirwa, McGuire,Kibor &Chema,1987；Houshaymi,Tekleghiorghis, Wilsmore, Miles, &Nicholas,2002）。Rurangirwa，Kouyate 和Niang( 1990)使用CPS作为抗原致敏乳胶颗粒，用来检测Mccp引起的CCPP。在肯尼亚，这种乳胶凝集试验已经作为常规检测Mccp抗体的方法。但敏感性相对ELISA和金标诊断方法较差。竞争酶联免疫吸附试验：此方法虽然能有效的用于Mccp感染后长期抗体检测（Thiaucourt, Bolske, Libeau, LeGoff,&Lefevre, 1994；Sharew，2005），但其敏感性太过，往往引起假阳性。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服上述现有技术的不足之处，提供一种山羊接触传染性胸膜肺炎抗体检测试纸条及其制备方法。

本发明的技术问题通过下述技术方案解决： 

一种山羊接触传染性胸膜肺炎抗体检测试纸条，由PVC衬板、硝酸纤维素膜、吸收垫、金标垫、样品垫5部分组成，其特征在于所述的硝酸纤维素膜上左端喷有抗山羊支原体山羊肺炎亚种IgG作为质控线，右端喷有山羊支原体山羊肺炎亚种多糖抗原作为检测线；所述的金标垫上喷有胶体金标记山羊支原体山羊肺炎亚种多糖抗原。

所述金标垫上喷的胶体金标记山羊支原体山羊肺炎亚种多糖抗原为山羊支原体山羊肺炎亚种纯化的多糖抗原。