[发明专利]一种二氢化茚酰胺化合物的检测分析方法

说明书

技术领域

本发明涉及药物质量分析领域，具体涉及一种二氢化茚酰胺类化合物的检测分析方法。

背景技术

蛋白酪氨酸激酶（PTK）是在正常和异常增殖过程中起重要作用的癌蛋白和原癌蛋白家族中的成员，是一种能选择性地使不同底物的酪氨酸残基磷酸化的一种酶，它们催化ATP的γ-磷酸基转移到许多重要蛋白质的酪氨酸残基上，使酚羟基磷酸化。蛋白酪氨酸激酶分为受体酪氨酸激酶（receptor tyrosine kinase，RTK），非受体酪氨酸激酶（nrPTK）以及IR和Janus激酶等。RTK包括胞外配体区、跨膜区和胞内活性区，nrPTKs是一种胞浆蛋白，一般没有细胞膜外结构域，nrPTKs现已经确认的约有 30 种，分为10大家族。与细胞生存和增殖相关的 nrPTKs主要有Abl、Src激酶家族（如 Src、Fyn、Yes、Blk、Yrk、Lck、Lyn和Csk等）以及其他酪氨酸激酶如 Jak、FAK、Ack、Fes、Rak和Brk 等。它们的主要生物学功能是介导细胞内的信号转导。nrPTKs 在细胞增殖、分化和死亡调控中起不同的作用，有些广泛表达，有些则只在特异组织中表达。在肿瘤组织中 nrPTKs 常被激活，再激活下游的信号转导途径，促进细胞增殖、抵抗细胞凋亡，促使肿瘤的发生和发展。目前，国外的制药公司已经研制出来数十种针对酪氨酸激酶的靶向抗癌药，例如格列卫（gleevec），易瑞沙（iressa），特罗凯（tarceva），和索坦（sutent）等，它们对特定酪氨酸激酶高表达型肿瘤疗效确切，毒副作用比经典的抗癌药小。

专利WO2010072166公开了全新一代的酪氨酸蛋白激酶抑制剂：二氢化茚酰胺类化合物，说明书实施例16公开了(1S)-1-(4-甲基哌嗪-1-基)-N-(4-甲基-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯基)-2,3-二氢化茚-5位酰胺倍半硫酸盐的合成方法， 但该专利文献没有公开保证该化合物的质量，即没有公开该化合物和含有该化合物制剂的含量检测分析方法。

发明内容

基于上述原因，申请人根据(1S)-1-(4-甲基哌嗪-1-基)-N-(4-甲基-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯基)-2,3-二氢化茚-5位酰胺倍半硫酸盐的性质，在高效液相检测过程中我们发现，为了提高(1S)-1-(4-甲基哌嗪-1-基)-N-(4-甲基-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯基)-2,3-二氢化茚-5位酰胺倍半硫酸盐的峰纯度、保持(1S)-1-(4-甲基哌嗪-1-基)-N-(4-甲基-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯基)-2,3-二氢化茚-5位酰胺倍半硫酸盐的稳定性，应该在流动相中加入一定量的盐，采用特定的流动相洗脱，这样就可以很好的将(1S)-1-(4-甲基哌嗪-1-基)-N-(4-甲基-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯基)-2,3-二氢化茚-5位酰胺倍半硫酸盐含量确定，同时可以保持(1S)-1-(4-甲基哌嗪-1-基)-N-(4-甲基-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯基)-2,3-二氢化茚-5位酰胺倍半硫酸盐的稳定性，使(1S)-1-(4-甲基哌嗪-1-基)-N-(4-甲基-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯基)-2,3-二氢化茚-5位酰胺倍半硫酸盐的含量得到精确的测定，但在流动相中加入太多量的盐会对填充柱损伤较大，而加入盐的量不在一定范围内就不能产生很好的峰纯度，我们通过长期实验研究确定：流动相为有机溶剂与含盐的水相组成，可以很好的将(1S)-1-(4-甲基哌嗪-1-基)-N-(4-甲基-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯基)-2,3-二氢化茚-5位酰胺倍半硫酸盐与其性质相近的杂质分离开，保证了(1S)-1-(4-甲基哌嗪-1-基)-N-(4-甲基-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯基)-2,3-二氢化茚-5位酰胺倍半硫酸盐含量的精确性，并可以很好的保持色谱柱的使用率。

本发明通过以下技术方案实现的。

一种二氢化茚酰胺化合物的检测分析方法，包括(1S)-1-(4-甲基哌嗪-1-基)-N-(4-甲基-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯基)-2,3-二氢化茚-5位酰胺倍半硫酸盐、含有(1S)-1-(4-甲基哌嗪-1-基)-N-(4-甲基-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯基)-2,3-二氢化茚-5位酰胺倍半硫酸盐的药物制剂的高效液相色谱法检测分析，其方法为采用C₁₈色谱柱，流动相为有机溶剂与含盐的水相组成。

其中所述的有机溶剂优选包括甲醇或乙腈。