[发明专利]一种菊属近缘属植物花粉的保藏方法

说明书

技术领域

本发明涉及菊花杂交育种领域，具体地说涉及一种菊属近缘属植物花粉的保藏方法。

背景技术

菊花起源于中国，在中国已有2000多年的栽培历史，不仅是中国十大传统名花之一，而且也是世界四大切花和十大盆花之一，已成为世界花卉产业中最重要的花卉植物之一。菊花栽培品种繁多，花色丰富，但在抗病虫、抗热、抗寒等抗性性状和株型等观赏性状等方面还存在一定的不足，致使严重降低了其产量、品质和生产效益，同时也限制了其推广应用地域范围。菊花近缘种属野生植物中具有许多栽培菊花所缺乏的优良性状，如甘菊、野菊等的抗病虫性，蒙菊的抗旱性，菊花脑的耐热性及阿尔菊的抗寒性等，因此通过中间杂交方式将这些优良性状导入栽培菊是进行菊花种质创新和品种改良的一条重要途径。

然而，大部分菊属近缘属野生种与栽培菊花远缘杂交存在花期不遇和地理隔离问题。如表1所示，栽培菊花的自然花期通常是7月到11月份，而亚菊属、匹菊属、蒿属和蓍属等大部分植物自然花期是4月份到6月份，造成花期不遇，进一步形成生殖隔离。菊属及其近缘属种植物中，太行菊属局限于中国中部，从而造成不同属间的地理隔离。花粉保存是解决花期不遇和地理隔离问题的重要途径之一。但是，菊属及其近缘属植物的花粉在一般条件下保存，花粉生活力会出现大幅度的下降，难以用来进行杂交育种研究。

表1 10个菊属近缘属野生种的优良特性、分布以及花期

发明内容

发明目的：本发明的目的是提供一种菊属近缘属植物花粉的保藏方法，以期克服菊花杂交中的障碍，实现不同菊属间各种优良基因的转移。

技术方案：为实现上述目的，本发明的一种菊属近缘属植物花粉的保藏方法包括：将采集的新鲜花粉晾晒1～2小时后放入锡箔纸包中，于-80～4℃下保藏。

每两个月进行一次花粉活力检测，所述花粉活力检测包括：将花粉取样放入ME3+200g·L^-1PEG4000培养基中，在20℃黑暗条件下培养2～10h，在显微镜下随机观察10个视野，若花粉管长度大于花粉直径视为花粉萌发。

所述花粉采集时间宜在晴天的10:00～14:00之间。

作为本发明的优选方案，所述包有花粉的锡箔纸包置于-25～-15℃下低温保藏。作为本发明的最优方案，所述保藏温度为-20℃。

采用本发明提供的方法可保藏各种菊属及其近缘属野生种的花粉，在杂交育种工作中，一般引入抗性基因增强菊花的各种抗性，包括抗旱、抗寒、抗虫等，如上述表1所列举。

有益效果：本发明的一种菊属近缘属植物花粉的保藏方法针对菊属及其近缘属野生种，提供了科学、简单的花粉保藏方法，利于杂交育种工作无时差、无地理隔离地开展，且探索出最利于维持花粉活性的保藏温度。

具体实施方式

实施例1

分别采集柳叶亚菊、灌木亚菊、牡蒿、大籽蒿、茼蒿、白晶菊、红花除虫菊、短舌匹菊、滨菊、千叶蓍10个菊属近缘属的新鲜花粉，采集时间为各属种对应花期，选择10:00～14:00之间的晴天。

将采集的新鲜花粉晾晒1～2小时后保证其干燥，然后取部分新鲜花粉进行活力测定，其余新鲜花粉放入锡箔纸包中，将包有花粉的锡箔纸包置于4℃下低温保藏，每隔2个月检测花粉生活力，连续测定3次。

花粉活力的检测具体如下：将花粉取样放入ME3+200g·L^-1PEG4000培养基中，在20℃黑暗条件下培养2～10h，在显微镜下随机观察10个视野，若花粉管长度大于花粉直径视为花粉萌发。

上述花粉经保藏后，每隔2隔月分别检测花粉活力，连续测定3次，统计如表2所示：

表2每隔2月测定的4℃下花粉保藏的花粉活力

注：表中值为平均值加标准误差，右上角所标字母代表经Turkey检验的显著性差异(p≤0.05)

由上表可以看出，4℃下进行花粉保藏其花粉活力下降较快，保藏1～2个月大部分属种的花粉活力下降不显著，但仍有部分属种在4℃下保藏2个月后，花粉活力下降较明显。

实施例2

分别采集柳叶亚菊、灌木亚菊、牡蒿、大籽蒿、茼蒿、白晶菊、红花除虫菊、短舌匹菊、滨菊、千叶蓍10个菊属近缘属的新鲜花粉，采集时间为各属种对应花期，选择10:00～14:00之间的晴天。